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目的:1.建立大鼠血浆、组织脏器中士的宁（STR）及其代谢产物士的宁氮氧化物（SNO）的高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）检测方法。2.建立士的宁和士的宁氮氧化物在雌雄大鼠体内的代谢动力学模型,研究其代谢动力学规律;研究士的宁和士的宁氮氧化物与服药时间的关系,建立士的宁服药时间的推断方法,为士的宁中毒案件的法医学鉴定提供实验依据。3.研究士的宁和士的宁氮氧化物在大鼠体内的分布规律,为士的宁中毒死亡相关案件的法医学鉴定提供实验依据。方法:1.前处理与检测1.1血浆样本精密移取180μL血浆样品,加入内标工作液（盐酸麻黄碱100ng/mL）20μL,涡旋15s混匀,加入1mL乙腈,涡旋20s,13000rpm/min离心10min,移取上清液至干净试管中,35℃氮气吹干,残留物用200μL流动相（甲醇-10mmol/L甲酸铵（用甲酸调pH=4）,40∶60）复溶,涡旋30s,取上清液过0.22μm有机膜,5μL进样。1.2脏器样本取待测组织200mg,加入200μL高纯水,60μL盐酸（1mo L/L）后充分剪碎;加入内标工作液（盐酸麻黄碱100ng/mL）20μL,涡旋15s混匀,加入1mL乙腈,涡旋20s,13000rpm/min离心10min,移取上清液至干净试管中,35℃氮气吹干,残留物用200μL流动相（甲醇-10mmol/L甲酸铵（用甲酸调pH=4）,40∶60）复溶,涡旋30s,取上清液过0.22μm有机膜,5μL进样。2.模型建立2.1代谢动力学模型SD大鼠40只,雌雄各半,体重为200±20g（购于北京市昌扬西山养殖场）,适应环境1周后禁食12h,灌胃。随机选取2只雄鼠和2只雌鼠作为空白对照组。取雄性SD大鼠18只,随机分为三组,每组6只;雌性SD大鼠18只,随机分为三组,每组6只,分别按1/2LD50、1/4LD50和治疗剂量（0.27 mg/kg）灌胃STR溶液,于灌胃后5、10、15、30、45、60、90、120、240、360、480、720、1440、2880min自眼眶取血并于5000rpm/min离心10min分离血浆,供仪器分析。2.2分布模型SD大鼠44只,雌雄各半,适应环境1周后禁食12h,灌胃。随机选取2只雄鼠和2只雌鼠作为空白对照组。取雄性SD大鼠20只,按时间点随机分为四组,每组5只;雌性SD大鼠20只,按时间点随机分为四组,每组5只,以1/4LD50灌胃STR溶液,分别于灌胃后15、30、120、720min处死大鼠,分离心、肝、脾、肺、肾和脑,脏器用超纯水洗净,滤纸吸干,供仪器分析。结果:1.士的宁及其代谢物的HPLC-MS/MS分析检测:大鼠血浆中,士的宁和士的宁氮氧化物的线性范围分别为0.25～300ng/mL和0.05～100ng/mL;士的宁和士的宁氮氧化物的最低检出限分别为0.1ng/mL和0.01ng/mL;定量下限分别为0.25ng/mL和0.05ng/mL;大鼠肝脏中,士的宁和士的宁氮氧化物的线性范围为1～1000ng/g和1～300ng/g,士的宁和士的宁氮氧化物的最低检出限分别0.25ng/g和0.25ng/g;定量下限分别为0.75ng/g和0.80ng/g;大鼠血浆和肝脏中士的宁和士的宁氮氧化物的线性相关系数（r）均大于0.999,日内和日间精密度均小于20%,提取回收率均大于80%,基质效应均在70%～120%范围内。2.代谢动力学:本研究采用非房室模型对数据进行分析。结果表明,雌性和雄性大鼠血浆中士的宁和士的宁氮氧化物的达峰浓度和血药浓度时间曲线下面积随灌胃剂量的增加而增加;三个剂量下,雌性大鼠血浆中士的宁和士的宁氮氧化物的达峰时间均为30min,雄性大鼠血浆中士的宁和士的宁氮氧化物的达峰时间均为45min;相同剂量下,雌性大鼠血浆中士的宁的达峰浓度均大于雄性大鼠,雌性大鼠血浆中士的宁氮氧化物的达峰浓度与雄性大鼠相差不大;雄性大鼠士的宁的消除半衰期均大于雌性大鼠;雄性大鼠士的宁和士的宁氮氧化物的血浆清除率均大于雌性大鼠。3.基于代谢动力学的时间推断:雌雄大鼠在各剂量下士的宁和士的宁氮氧化物的平均浓度-时间曲线拟合良好,R2大部分在0.90以上,随机选取部分实验数据计算服药时间的误差,结果表明,采用雌雄大鼠血浆中士的宁和士的宁氮氧化物的平均浓度和相应曲线方程推断,服药时间的误差大多小于20%。4.士的宁和士的宁氮氧化物在大鼠体内的分布:大鼠经口灌胃1/4LD50剂量染毒,死亡动物各组织脏器士的宁含量由高到低为:雌性组:15min处死组:肝脏>肾脏>肺>脾>心>脑;30min处死组:肝脏>肾脏>肺>脾>心>脑;120min处死组:肝脏>肾脏>脾>肺>心>脑;720min处死组:肾脏>肝脏>脾>肺>脑>心。雄性组:15min处死组:肝脏>肾脏>肺>脾>心>脑;30min处死组:肝脏>肾脏>肺>脾>心>脑;120min处死组:肾脏>肝脏>脾>肺>心>脑;720min处死组:仅在肝脏和肾脏中检出少量士的宁。士的宁在雌性和雄性大鼠体内的分布情况基本一致;随着时间的增加,士的宁在雌雄大鼠各个脏器中的含量逐渐减少;相同时间下,雌性组士的宁在各脏器中含量与雄性组相比有明显的差异,雌性大鼠各脏器士的宁的浓度均高于雄性大鼠。士的宁氮氧化物仅在15min处死组和30min处死组的肝脏、肾脏、肺脏和脾脏中检出,但其含量均比较低,大部分数值甚至低于士的宁氮氧化物的定量下限。结论:1.建立了士的宁及其代谢物的HPLC-MS/MS检测方法,样品前处理过程简单快速;检测方法灵敏度高、回收率高,可用于士的宁中毒死亡案例中毒物的分析检测。2.本研究建立了士的宁和士的宁氮氧化物在雌雄大鼠体内的代谢动力学模型。通过非房室模型对数据进行分析,得到士的宁和士的宁氮氧化物的药代动力学参数,可为士的宁中毒死亡案件的法医学鉴定提供实验依据。3.本研究建立士的宁经口染毒后服药时间的推断方法。血浆中士的宁和士的宁氮氧化物的平均血药浓度与服药时间的拟合方程在0～48h内拟合度较高,R2大部分在0.90以上。4.相同时间下,雌性大鼠各脏器士的宁的浓度均高于雄性大鼠;士的宁在雌雄大鼠体内的分布基本一致,在肝脏和肾脏中分布较高。士的宁氮氧化物在主要脏器能检出,但其浓度太低,远远低于原型士的宁,说明士的宁可以在体内转化生成士的宁氮氧化物,但其可能不是士的宁在体内的主要代谢产物。