籽瓜多糖提取及其结构表征和对益生菌生长的影响

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多糖广泛存在于植物、微生物、动物以及水藻当中,已有相关研究结果显示,天然植物多糖具备多种生理活性功能,包括调节人体免疫力、抗过敏、降低血糖以及抑制炎症等。与人工合成药物相对比而言,植物多糖不但可以起到更好的益生效果,而且有更高的安全性,能够用于替代合成药物。所以,在新植物原料里面提取出活性多糖,同时研究分析基本结构以及生物活性等是当前国内外研究界的重点关注课题。籽瓜以收取瓜籽为主要目的,其瓜瓤和瓜皮被丢弃在农田间,造成了资源浪费和环境污染问题。并且在加工的时候所产生的一些副产物也并未得到合理利用。可以说,在籽瓜加工领域,如何提升加工副产物有效利用率以及研发出高附加值产品,是亟待重点解决的难题。总体而言,国内外针对籽瓜多糖提取、生理活性分析以及结构研究方面报道尚且较少。
  以此为背景,本文分析探讨了籽瓜多糖的提取,并进行结构表征,明确其针对肠道益生菌体外增殖产生的影响。在籽瓜多糖提取工艺进行优化的基础之上,按照条件制备出籽瓜粗多糖。随后,籽瓜粗多糖分离得到三种多糖组分(SMP-1、SMP-2、SMP-3),分析籽瓜多糖SMP-1空间一级结构,并考察了其对益生菌的体外增殖作用。主要研究内容及结果如下:(1)分析籽瓜多糖的提取温度、提取时间、液料比和超声功率等工艺参数,通过单因素试验确定以上四个因素对籽瓜多糖提取率的影响。选取提取温度、液料比、提取时间以及超声功率等几个因素当自变量,响应值则是多糖提取率,借助组合试验以及响应面分析等方式,实现对籽瓜多糖提取技术工艺的优化,构建预测模型,获取最佳提取工艺:提取温度为42℃、提取时间为2h、料液比为1:30g/mL、超声功率为220W。
  (2)籽瓜多糖结构的表征分析。分析表明SMP-1是一种中性多糖组分,平均分子量为97403Da;GC-MS分析表明SMP-1是由阿拉伯糖和半乳糖两种单糖组成;红外光谱分析表明:SMP-1具有多糖的特征吸收峰;甲基化分析和核磁共振分析可推断其结构式。
  (3)籽瓜多糖针对肠道益生菌产生的体外增殖影响分析。选择无碳源培养基并添加多个浓度水平的籽瓜多糖,将空白与低聚果糖(FOS)确定成对照对象,在将多个类型益生菌进行接种之后,实施体外厌氧培养,时间为48h,然后对培养基里面对应pH值进行测定。籽瓜多糖SMP-1、SMP-2、SMP-3对青春双歧杆菌、长双歧杆菌、婴儿双歧杆菌以及嗜酸乳杆菌等都能够发挥出促增殖的影响作用。而在培养环节之下,培养基对应pH值有所减小,可见籽瓜多糖能够被益生菌有效利用,并形成短链脂肪酸。此外,在37℃下厌氧环境下培养48h,于0h、4h、8h、16h、24h、32h、40h以及48h取样,培养液在600nm处吸光度值进行检测,绘制出加入籽瓜多糖的双歧杆菌以及嗜酸乳杆菌培养基生长速率曲线,进而对籽瓜多糖影响各菌种生长速率作出评价。
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