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天麻多糖是天麻的主要成分之一,具有广泛的生物活性。近年来,随着天麻多糖类物质药理作用的研究的深入,尤其是具有抑制肿瘤、抗炎、抗辐射、调节免疫、促进蛋白质合成等功效,使其研究越发重要。本项目通过对天麻多糖提取工艺、纯化和初步结构表征的研究,结果表明:
(1)通过对天麻多糖浸提时的单因素、正交试验,确定了天麻多糖浸提最佳工艺条件如下:料水比1:40,浸提温度120℃,浸提时间3 h。微波和超声波均能增加多糖得率,但微波处理的提取效果要明显好于超声波,微波处理8分钟左右即能达到比较好的效果。热水浸提次数以2次为佳,累计可达到93.29%的多糖得率。醇沉工艺优化条件为4倍体积乙醇沉淀6小时。
(2)Sevag法、酶法、酶+Sevag比较表明:采用酶法除蛋白效果比较理想,一次就能达到比较好的效果,胰蛋白酶用量为2.0U/mg,处理时间以5h最好;酶解结合一次Sevag法再醇沉后,蛋白脱出率为90.1%。
(3)天麻粗多糖重均分子量为4.23×10<5>,分散系数3.66,最大值达到1.38×10<6>da。经HPLC分析,纯化后GPSa的分子量为4.97×10<5>da,主要由葡萄糖构成,还含有少量的鼠李糖和甘露糖,其鼠李糖:甘露糖:葡萄糖=1:1.07:67.24。经红外光谱(IR)、<1>H和<13>C核磁共振(NMR)结构分析确定其糖链主要结构为α-(1→4)吡喃型D-葡萄糖。