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烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidases,NOXs）是心血管系统中生成活性氧（reactive oxygen species,ROS）的主要酶源。NOXs是具有多种亚基的跨膜蛋白酶,迄今为止已鉴定出7种异构体,分别为NOX1～NOX5、双重氧化酶（dual oxidase,DUOX）1及DUOX2,在心脏主要表达NOX2和NOX4两种同工型。研究表明,NOXs通过生成ROS可参与心肌肥大、纤维化、细胞凋亡以及抵制慢性负荷诱导的心肌应激等过程。而G蛋白偶联受体激动剂,如内皮素-1（endothelin-1,ET-1）等通过NOXs的活化触发ROS的生成,继而刺激其下游信号转导通路介导心血管系统的病变过程。然而其对心房尤其是在缺氧条件下具有抗炎、抗氧化、促使细胞适应缺氧环境和保护细胞功能的心房钠尿肽（atrial natriuretic peptide,ANP）分泌的作用尚不甚清楚。因此,本研究利用大鼠离体搏动的心房灌流装置制备急性缺氧模型,观察缺氧时内源性ET-1对心房NOXs表达的影响,探讨其对缺氧时ANP分泌的作用及其机制,为阐明缺氧时ANP分泌的机理及其功能以及临床诊治相关疾病的利用提供必要的理论和实验依据。本研究结果如下:1、缺氧明显增加心房ET-1的释放并显著上调其两种受体（ET receptortype A and B,ETRA&ETRB）的表达,同时强烈促进ANP的分泌并抑制搏动压;ETRA和 ETRB 的阻断剂BQ123（0.3 μmol/L）及 BQ788（0.3 μmol/L）明显减缓缺氧促进ANP分泌的作用。另外,缺氧还明显上调心房NOX4但不是NOX2的表达,并显著增加心房肌组织过氧化氢（hydrogen peroxide,H2O2）的生成;BQ123和BQ788及NOX4的阻断剂 GLX351322（35.0 μmol/L）可分别完全消除缺氧上调心房NOX4的表达和H2O2的生成作用;而GLX351322及抗氧化剂Nacetyl cysteine（NAC,15.0 mmol/L）对缺氧时 ANP 分泌的作用与 BQ123 和 BQ788 的抑制效应类似。2、在常氧条件下,外源性ET-1（3.0 nmol/L）明显上调NOX4的表达,并显著增强胞浆磷脂酶 A2（cytosolic phospholipase A2,cPLA2）的磷酸化;BQ123及BQ788可完全阻断ET-1对NOX4表达的作用,而分泌型PLA2（secreted PLA2,sPLA2）的阻断剂 varespladib（5.0μmol/L）不仅显着抑制ET-1对cPLA2磷酸化的影响,而且可消除ET-1诱导NOX4表达的效应,cPLA2的阻断剂CAY10650（0.12 μmol/L）则模拟ETRs及sPLA2的阻断剂对ET-1诱导NOX4表达的阻断作用。3、缺氧明显增加Src的表达,该作用也可被BQ123及BQ788所完全阻断,而且GLX351322及NAC同样可几乎完全解除缺氧对Src表达的效应。另外,外源性ET-1同样显著上调Src的表达,其作用仍被NAC所完全消除。4、缺氧明显增强细胞外信号调节激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2）和蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）的磷酸化,并显著上调转录因子GATA4的表达;缺氧对ERK1/2和Akt的作用被ETRs及Src的阻断剂Src inhibitor 1（1.0 μmol/L）所完全消除,而缺氧诱导的GATA4也被ERK1/2和 Akt 的阻断剂 PD98059（10.0 μmol/L）及 LY294002（10.0 μmol/L）所完全解除,并伴随缺氧时ANP分泌的显著减缓。5、外源性ET-1明显增加常氧心房搏动压,并显著上调沉默信息调节子1（silentinformationregulator 1,sirtuin 1/Sirt1）、p-Akt、p62、Keap1 及核因子红细胞 2 相关因子 2（nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2）的表达,而GLX351322可完全消除ET-1对Sirt1及Nrf2表达的作用;Sirt1的阻断剂EX527（0.25 μmol/L）也可完全阻断ET-1对p-Akt、p62、Keap1及Nrf2表达的效应。同样,在缺氧下GLX351322可完全解除缺氧上调Sirt1及Nrf2表达的作用,EX527也可完全废除缺氧对p-Akt、p62、Keap1及Nrf2表达的效应。6、常氧下的外源性ET-1和缺氧均能显着上调活化转录因子（activating transcription factor,ATF）3 和 4 的表达,其作用可被 Nrf2 的阻断剂 ML385（10.0μmol/L）所完全消除。7、常氧下的外源性ET-1和缺氧还能活化T细胞因子3（T cell factor,TCF3）、TCF4及淋巴增强因子1（lymphoid enhancer factor,LEF1）的活性,该作用可被ML385完全阻断,并伴随ET-1或缺氧促进ANP分泌的显著减缓;ML385也明显抑制外源性ET-1增加心房搏动压的作用,但未能明显改变缺氧抑制搏动压的影响。本研究结果提示:1、缺氧时ET-1调控的NOX4-Src信号通路通过激活ERK1/2-和Akt-GATA4途径参与调节大鼠离体搏动心房ANP的分泌。2、NOX4-Sirt1-Nrf2信号通路通过激活ATF3和ATF4活化TCF3/及TCF4/LEF1的途径参与调控缺氧时ANP分泌的过程。