【摘 要】
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本课题旨在通过大脑淋巴系统的运输功能,结合脑淋巴液的代谢组学分析,研究脑疾病诊断的标记物。本课题的实验动物是大鼠,研究的脑疾病包括伪狂犬病毒脑部感染模型,帕金森氏病神经退行性疾病模型,C6脑胶质瘤模型。采集到实验组和对照组的大鼠颈深淋巴管中的脑淋巴液后,使用了核磁共振波谱的代谢组学方法,初始数据采用体积归一化和标准化的处理方式,有显著差异的代谢物进行了代谢通路分析,结果与已发表数据进行了比对。得到
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本课题旨在通过大脑淋巴系统的运输功能,结合脑淋巴液的代谢组学分析,研究脑疾病诊断的标记物。本课题的实验动物是大鼠,研究的脑疾病包括伪狂犬病毒脑部感染模型,帕金森氏病神经退行性疾病模型,C6脑胶质瘤模型。采集到实验组和对照组的大鼠颈深淋巴管中的脑淋巴液后,使用了核磁共振波谱的代谢组学方法,初始数据采用体积归一化和标准化的处理方式,有显著差异的代谢物进行了代谢通路分析,结果与已发表数据进行了比对。得到了如下结果:1.染料示踪并验证大脑淋巴循环通路及绘制示意图向大鼠的侧脑室注射了Evans Blue染料,停针20 min后,观察到颈深淋巴结呈深蓝色,颈浅淋巴结没有变蓝,停针20-30 min之间,颈浅淋巴结缓慢变蓝,停针30 min后颈浅淋巴结完全变蓝,且颈浅淋巴结的淋巴管也呈现蓝色,并且颈浅淋巴管在面部出现分支,一支延伸到眼眶下,另一支延伸到鼻部。另外,在颅底、鼻腔内都发现了蓝色的管道。综合解剖成像和免疫荧光鉴定的结果,以示意图的形式绘制了大脑淋巴循环通路。2.构建并验证了大鼠伪狂犬病毒脑部感染模型向大鼠后肢肌肉内注射了含有绿色荧光蛋白的伪狂犬病毒PRV-152,鼠脑振荡切片观察到神经元表达绿色荧光蛋白,确认了鼠脑内的病毒感染情况。脑淋巴液的NMR检测中的差异变化代谢物有:乙醇,二甲基甘氨酸,二氨基甘氨酸脱氢酶,谷氨酸盐以及未知物质U3。3.构建并验证了大鼠帕金森氏疾病模型向大鼠脑纹状体注射了六羟基多巴(6-OHDA),注射后21天颈部皮下注射阿扑吗啡诱导大鼠转圈,大鼠向药物损毁的对侧以首尾相连的方式绕圈7 r/min以上为建模成功,对建模成功的老鼠采集脑淋巴液。脑淋巴液的NMR检测中的差异变化代谢物有:葡萄糖,O-乙酰基糖蛋白,N-乙酰糖蛋白,乙酰乙酸盐。4.构建并验证了大鼠C6脑胶质瘤模型向大鼠脑实质注射了C6胶质瘤细胞,注射后28天左右取脑和脑淋巴液,鼠脑石蜡切片的H&E染色观察到了边界清晰的肿瘤组织。脑淋巴液的NMR检测中的特异性差异变化代谢物有:葡萄糖,O-乙酰糖蛋白,N-乙酰糖蛋白,苯丙氨酸,乳酸盐,丙酮酸盐,乙酰乙酸盐,乙醇,肌氨素,血酮。5.比较分析了脑脊液和脑淋巴液中代谢物成分的相对浓度
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