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牛乳清蛋白是婴幼儿食物的重要来源,但容易引起过敏反应,威胁健康。本论文研究了超声处理对乳清蛋白结构特性的影响,筛选了有利于发酵和酶解的超声预处理条件,从多株菌株中筛选出能发酵水解乳清蛋白的马克思克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)Z17,优化了马克思克鲁维酵母Z17降低乳清蛋白致敏性的发酵条件,探究了利用马克思克鲁维酵母Z17胞内粗酶酶解转化乳清蛋白的最优超声—酶解条件。
对经超声处理的乳清蛋白结构和功能进行检测,发现超声处理能改变乳清蛋白的结构和功能,超声20min,α-LA无规则卷曲的比例增加11.3%,β-LG无规则卷曲的比例增加14.0%;超声使α-LA、β-LG的最大荧光发射波长产生最多6nm的红移现象,同时降低荧光强度;此外,超声也会改变乳清蛋白乳液的粘弹性,改变乳清蛋白乳液凝胶的微观结构以及持水量,超声预处理能促进木瓜蛋白酶水解乳清蛋白。
从马克思克鲁维酵母、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)等30株菌株中,筛选得到水解乳清蛋白能力最强的菌株马克思克鲁维酵母Z17。通过单因素实验研究,得到有利于乳清蛋白水解的超声预处理条件:超声间歇比2s∶1s、超声功率200W/mL、超声时间15min。采用响应面法(RSM)优化降低乳清蛋白致敏性的发酵条件,获得的最优条件为:发酵温度35℃、初始pH7.25、接种量10%(v/v)时,α-LA抗原性降低24.48%、β-LG抗原性降低52.86%。
从发酵30h的发酵液中分离纯化得到马克思克鲁维酵母Z17的胞内、胞外粗酶,分别测定其中蛋白酶、氨肽酶和羧肽酶的活性,研究发现仅胞内粗酶具有蛋白酶、氨肽酶和羧肽酶活性。通过响应面优化实验,得到降低α-LA、β-LG抗原性的最优超声—酶解条件:超声间歇时间16s(工作时间5s),超声功率400W/mL,初始pH6.16,酶解温度18.48℃,可使α-LA、β-LG的抗原性分别降低65.56%、57.96%。
对经超声处理的乳清蛋白结构和功能进行检测,发现超声处理能改变乳清蛋白的结构和功能,超声20min,α-LA无规则卷曲的比例增加11.3%,β-LG无规则卷曲的比例增加14.0%;超声使α-LA、β-LG的最大荧光发射波长产生最多6nm的红移现象,同时降低荧光强度;此外,超声也会改变乳清蛋白乳液的粘弹性,改变乳清蛋白乳液凝胶的微观结构以及持水量,超声预处理能促进木瓜蛋白酶水解乳清蛋白。
从马克思克鲁维酵母、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)等30株菌株中,筛选得到水解乳清蛋白能力最强的菌株马克思克鲁维酵母Z17。通过单因素实验研究,得到有利于乳清蛋白水解的超声预处理条件:超声间歇比2s∶1s、超声功率200W/mL、超声时间15min。采用响应面法(RSM)优化降低乳清蛋白致敏性的发酵条件,获得的最优条件为:发酵温度35℃、初始pH7.25、接种量10%(v/v)时,α-LA抗原性降低24.48%、β-LG抗原性降低52.86%。
从发酵30h的发酵液中分离纯化得到马克思克鲁维酵母Z17的胞内、胞外粗酶,分别测定其中蛋白酶、氨肽酶和羧肽酶的活性,研究发现仅胞内粗酶具有蛋白酶、氨肽酶和羧肽酶活性。通过响应面优化实验,得到降低α-LA、β-LG抗原性的最优超声—酶解条件:超声间歇时间16s(工作时间5s),超声功率400W/mL,初始pH6.16,酶解温度18.48℃,可使α-LA、β-LG的抗原性分别降低65.56%、57.96%。