GLUT1在MA与HIV-Tat蛋白协同致血脑屏障通透性改变中的作用及机制

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目的:通过观察甲基苯丙胺(MA)及HIV-Tat蛋白协同致大鼠血脑屏障通透性的改变,探讨GLUT1在MA与HIV-Tat蛋白协同致血脑屏障通透性改变中的作用及机制。方法:采用腹腔多次注射MA、N-乙酰半胱胺酸(NAC)和尾静脉注射HIV-Tat蛋白建立MA及HIV-Tat蛋白大鼠血脑屏障损伤模型。随机分配设立对照组和实验组。实验组包括MA组、Tat蛋白组、MA+Tat蛋白组及NAC+MA+Tat蛋白组。模型建立后取各组大鼠脑进行伊文思蓝含量测定和电镜观察并通过western-blotting和免疫组化法观察GLUT1和4种紧密连接蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,实验组脑组织中EB含量不同程度增加,紧密连接蛋白阳性表达减少,提示实验组血脑屏障通透性不同程度增加(P<0.05); MA+Tat组与MA组、Tat组相比,EB含量升高明显,紧密连接蛋白阳性表达显著下降,提示MA与HIV-Tat蛋白联用能更大程度地增加血脑屏障通透性;NAC+MA+Tat组与MA+Tat组相比,EB含量降低,紧密连接蛋白阳性表达上升,说明NAC能一定程度拮抗MA与HIV-Tat蛋白对血脑屏障通透性的影响;蛋白半定量实验显示,对照组GLUT1的表达高于各实验组,MA组、Tat组、NAC+MA+Tat组与MA+Tat组比较,GLUT1表达较高(P<0.01)。各实验组在电镜下观察到血脑屏障一系列超微结构改变,如脑微血管内皮细胞肿胀变薄,血管周围胶质细胞和星形胶质细胞肿胀,胞饮小泡增加等,这些改变以MA+Tat组最为显著。结论:MA及HIV-Tat蛋白能协同致血脑屏障通透性改变,GLUT1参与了MA及HIV-Tat蛋白协同致血脑屏障通透性改变的过程。
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