目的:角膜缘黑素细胞位于角膜缘微环境内,其特殊的结构和功能可能与维持角膜缘微环境稳态密切相关,本研究探讨黑素细胞对角膜缘上皮细胞生长增殖的影响以及在UV-B照射下对角膜缘干细胞的保护作用。方法:人角膜缘冰冻切片进行免疫荧光染色,探明黑素细胞在人角膜缘处的分布规律。免疫组化染色和RT-PCR方法检测新西兰白兔和福建黄兔角膜缘黑素细胞数量和分布的差异。在UV-B照射后,分别对人、新西兰白兔和福建黄兔的角膜缘进行HE染色、免疫荧光染色和TUNEL染色,使用8-OHDG标记角膜缘上皮细胞DNA损伤。建立黑素细胞与角膜缘上皮细胞共培养体系,并和3T3细胞与角膜缘上皮细胞共培养体系进行比较,同时观察UV-B照射后角膜缘上皮细胞克隆的变化,利用结晶紫染色观察克隆的形态和大小并计算克隆形成率。通过Transwell培养分析黑色细胞对角膜缘上皮细胞的影响是否与细胞接触有关。结果:黑素细胞在人和兔角膜缘处均位于角膜缘上皮基底部,黄兔角膜缘黑素细胞数量较白兔角膜缘黑素细胞多。在UV-B照射24小时后,人角膜缘和黄兔角膜缘出现黑色素帽覆盖在上皮细胞核上方,减少UV-B对角膜缘上皮细胞的损害。在等量的UV-B照射下,黄兔角膜缘上皮细胞DNA损伤和细胞凋亡远较白兔处轻且随着时间推移,黄兔角膜缘处的DNA损伤和细胞凋亡逐渐被修复。体外培养条件下,黑素细胞滋养组角膜缘上皮细胞克隆生长较快、形态较大,且UV-B并未对其造成太大的损伤。黑素细胞滋养组克隆K14的表达远高于3T3细胞滋养组。Transwell共培养中,直接接触组角膜缘上皮细胞K14的表达远高于非直接接触组,且在UV-B照射后直接接触组角膜缘上皮细胞面出现Melan-A染色。结论:UV-B照射下,角膜缘黑素细胞通过分泌并传递黑素颗粒从而保护角膜缘干细胞免受DNA损伤和细胞凋亡,黑素细胞能够维持角膜缘干细胞干性并促进角膜缘上皮细胞增殖,黑素细胞对角膜缘干细胞的保护作用需通过细胞间直接接触来实现。