【摘 要】
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第一部分:急性假膜型念珠菌性口炎小鼠模型的建立及评估目的:建立急性假膜型念珠菌性口炎小鼠模型并进行评估。方法:选取6周龄雄性ICR小鼠40只,随机分为2组,空白对照组20只,模型组20只。两组小鼠均接受免疫抑制,模型组在舌背接种浓度为1×107CFU/mL的SC5314白念珠菌菌液,空白对照组在舌背涂抹生理盐水。在接种后的第3天,行临床表现观察、舌背白斑面积评分及舌背真菌载量测定,处死动物行组织载
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第一部分:急性假膜型念珠菌性口炎小鼠模型的建立及评估目的:建立急性假膜型念珠菌性口炎小鼠模型并进行评估。方法:选取6周龄雄性ICR小鼠40只,随机分为2组,空白对照组20只,模型组20只。两组小鼠均接受免疫抑制,模型组在舌背接种浓度为1×107CFU/mL的SC5314白念珠菌菌液,空白对照组在舌背涂抹生理盐水。在接种后的第3天,行临床表现观察、舌背白斑面积评分及舌背真菌载量测定,处死动物行组织载量测定及组织病理学检查,评估急性假膜型念珠菌性口炎模型建立情况。结果:1.白念珠菌接种前,空白对照组和模型组小鼠体重无统计学差异,接种后第3天,与空白对照组相比模型组小鼠体重减轻,具有统计学意义（P<0.05）。2.白念珠菌接种前,空白对照组和模型组小鼠舌部均未见明显异常。接种后第3天,空白对照组小鼠舌背未见红斑或白色伪膜。模型组15只小鼠舌背白色伪膜（病损评分主要为3分至4分）,5只小鼠舌背未见红斑或白色伪膜。3.白念珠菌接种后第3天,空白对照组小鼠舌背真菌载量为0（未显示）。模型组的15只小鼠舌背真菌载量为4.77±0.35Log10CFU/mL,5只小鼠舌背真菌载量为0（未显示）。4.白念珠菌接种后第3天,空白对照组小鼠肝、肾及粪便的白念珠菌载量为0（未显示）。模型组小鼠肝、肾组织载量为0（未显示）,结肠粪便载量为7.17×104CFU/g。5.组织病理学检查:经HE染色显示空白对照组舌背丝状乳头排列整齐,上皮结构规则,模型组上皮组织增厚,上皮浅层可见中性粒细胞浸润,个别位置微小脓肿形成。经PAS染色显示空白对照组未见念珠菌菌丝及孢子。模型组在角化层或上皮的外1/3处可见大量菌丝和孢子,菌丝为细长杆形,呈串珠状或分节状,与上皮表面多呈垂直型或呈一定角度。结论:免疫抑制ICR小鼠并在口腔接种白念珠菌,成功建立了急性假膜型念珠菌性口炎模型。第二部分:PAD治疗小鼠急性假膜型念珠菌性口炎的疗效观察目的:探讨PAD治疗小鼠急性假膜型念珠菌性口炎的治疗效果,为PAD治疗急性假膜型念珠菌性口炎提供实验依据。方法:选取6周龄雄性ICR小鼠60只,采用第一部分的方法建立急性假膜型念珠菌性口炎模型,共成模47只。按照随机数字表法从成模的小鼠中选出45只并随机分为对照组、PAD治疗1组（以下称治疗1组）和PA D治疗2组（以下称治疗2组）,每组15只。治疗前测量所有小鼠舌背白斑面积。采用基于PADTM Plus的光活化消毒技术对治疗1组、治疗2组小鼠进行治疗:治疗1组:在小鼠舌背部涂抹1mg/mL的甲苯胺蓝溶液,孵育1min,750mW LED红光照射1min;治疗2组:在小鼠舌背部涂抹1mg/mL的甲苯胺蓝溶液,孵育2min,750mW LED红光照射1min;对照组:小鼠不接受任何治疗。对照组直接行舌背真菌载量测定,治疗1组、治疗2组接受PAD治疗后即刻行舌背真菌载量测定。治疗后48h,分别观察3组小鼠的临床表现,行舌背白斑面积测定、舌背真菌载量测定,处死小鼠行组织病理学检查。根据舌背病损改变、舌背真菌载量及组织病理学变化评估PAD治疗小鼠急性假膜型念珠菌性口炎的效果。结果:1.PAD治疗前,对照组、治疗1组和治疗2组舌背白斑面积评分差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后48h,治疗1组、治疗2组舌背白斑面积评分均低于对照组,具有统计学意义（P<0.05）,治疗1组与治疗2组舌背白斑面积评分差异无统计学意义（P>0.05）。2.PAD治疗后即刻,治疗1组、治疗2组舌背真菌载量均低于对照组,具有统计学意义（P<0.05）,治疗1组与治疗2组舌背真菌载量差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后48h,治疗1组、治疗2组舌背真菌载量均低于对照组,具有统计学意义（P<0.05）,治疗1组与治疗2组舌背真菌载量差异无统计学意义（P>0.05）。3.PAD治疗后舌背组织病理学:治疗后48h,经HE染色显示对照组可见上皮组织增厚且上皮钉突不规则,上皮浅层中性粒细胞浸润,个别位置微小脓肿形成。治疗1组和治疗2组上皮结构较规则,两治疗组间未见明显差异。经PAS染色显示对照组大量菌丝团覆盖,上皮浅表可见长杆形或分节状菌丝侵入,治疗1组和治疗2组菌丝数量明显少于对照组,偶见菌丝侵入角化层,但未深入上皮层,两治疗组间未见明显差异。结论:1.光活化消毒技术能显著降低急性假膜型念珠菌性口炎模型小鼠舌背真菌载量,减轻小鼠舌背白斑症状。2.采用1mg/mL甲苯胺蓝溶液孵育1min,750mW LED红光照射1min治疗急性假膜型念珠菌性口炎能达到较明显的治疗效果。在其他参数不变的情况下,延长1mg/mL甲苯胺蓝溶液的孵育时间不会提高治疗急性假膜型念珠菌性口炎的效果。
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