脂肪酸合酶(Fatty acid synthase, FAS;EC 2.3.1.85)在哺乳动物的脂肪酸合成过程中具有重要作用,它利用乙酰-CoA、丙二酸单酰-CoA和NADPH催化饱和脂肪酸的合成。山羊乳腺短、中链脂肪酸合成受到FAS中的乙酰/丙二酸单酰基转移酶(Acetyl-CoA and malonyl-CoA transacylases, AT/MT)功能域的转酰基作用调控。通过调控FAS基因表达而改变山羊乳脂肪酸组成,将成为从遗传育种的角度解决山羊乳膻味问题的重要手段之一。对山羊乳短、中链脂肪酸代谢的研究可以为羊奶膻味的形成机理提供依据,同时在如何合理利用羊奶脂肪酸的特点,提高羊奶中对人体有益的脂肪酸含量方面也具有重要现实意义。本研究以西北农林科技大学萨能羊原种场和陕西省千阳县种羊场的足月正常分娩、健康的西农萨能羊为试验材料,运用RT-PCR结合RACE的方法获得了西农萨能羊乳腺FAS基因cDNA序列全长,并对FAS基因启动子部分序列进行了克隆和序列分析;采用实时定量PCR的方法检测了不同泌乳阶段(盛期、中期、后期、末期及干奶期)西农萨能羊乳腺FAS基因mRNA的表达丰度。该研究旨在为西农萨能羊乳腺FAS基因的功能研究奠定基础,通过掌握FAS基因表达规律,为山羊乳腺脂肪酸代谢、FAS基因功能以及山羊奶膻味的遗传调控机理研究提供试验依据。试验结果如下:1.克隆获得了西农萨能羊FAS基因编码区KS功能域(exon2-exon9)、AT/MT功能域(exon8-exon16)、DH-ACP功能域(exon16-exon39)及TE功能域(exon39-exon42)等四个片段,大小分别为1052 bp、1449 bp、4356 bp和787 bp,登录GenBank,收录号分别为EF042286、DQ915966、EF068247、EF059988(数据已公布),3′末端和5′末端序列长度分别为1250 bp和360 bp,将六个片段进行序列拼接首次完成了西农萨能羊FAS基因共8217 bp的cDNA序列全长,编码2514个氨基酸残基;2.克隆获得西农萨能羊FAS基因启动子序列片段719 bp,GenBank收录号EF556550(数据尚未公布),序列分析表明TATA盒位于-41 bp处,一个类似于CAAT盒的序列位于-74 bp处,这些都是典型的真核生物启动子元件。TATA盒上游区域有76%以上的G/C含量和四个GC盒(GGGCGG和CCGCCC),潜在的核转录因子结合位点Sp1位于-99 bp、-174 bp、-255 bp和-320 bp;3.泌乳末期乳腺中FAS基因mRNA表达水平最高,干奶期则最低。西农萨能羊乳腺FAS基因在不同泌乳阶段mRNA表达量存在差异,其含量变化规律可能与产奶量及乳脂率的变化相关。