骨髓间充质干细胞免疫调节作用的机制与应用研究

来源 :中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ZXFAMD
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本文研究工作分为两部分: 第一部分:目的:研究间充质干细胞(MSCs)和全骨髓细胞治疗免疫介导再生障碍性贫血(从)小鼠的疗效比较。 方法:建立BALB/C小鼠免疫介导再生障碍性贫血模型,观察MSCs和全骨髓细胞对动物模型的疗效,包括记录一般情况变化、血常规检查、骨髓切片眦染色,流式细胞术检测治疗后小鼠外周血和脾脏的CD4+、CD8+T淋巴细胞。 结果:①观察AA模型小鼠至第20天,对照组全部死亡(6/6);MSCs组4例死亡(4/8);全骨髓细胞组1例死亡(1/8)。②MSCs组和全骨髓细胞组存活小鼠,其体重变化趋势、血细胞计数、骨髓造血功能恢复均无明显差异。③检测MSCs组和全骨髓细胞组脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+/CD8+的比值示无差异,与正常小鼠相比,MSCs组外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞水平有下降趋势。全骨髓细胞组CD8+T细胞水平明显下降。 结论:单独使用MSCs治疗能够使部分AA小鼠症状改善、造血恢复。MSCs治疗有效率不如全骨髓细胞,但两组治疗有效者一般状况改善、恢复造血、T淋巴细胞亚群分布无明显差异。MSCs有一定的临床应用价值。 第二部分:目的:探讨白细胞介素23(IL-23)在白血病患者中的表达规律以及人骨髓来源间充质干细胞(MSCs)对IL-23和TGF-β 1表达的影响。 方法:运用实时定量PCR方法,检测20例急性髓系白血病患者、10例急性淋巴细胞白血病患者、10例慢性粒细胞白血病患者和10例正常对照中骨髓单个核细胞IL-23 p19 mRNA的表达水平。检测20例急性白血病患者(10例AML、10例ALL)骨髓单个核细胞原代培养及其与MSCs共培养后IL-23p19、TGF-β 1 mRNA的表达水平。用ELISA方法检测急性白血病患者血浆、骨髓上清,正常对照血浆中IL.23含量;检测骨髓单个核细胞原代培养上清中以及与MSCs共培养后上清中IL-23含量。 结果:急性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病患者骨髓单个核细胞IL-23p19 mRNA的表达水平与正常对照相比无统计学差异,三者之间也无统计学差异(P>0.05);急性白血病患者骨髓单个核细胞与MSCs共培养后IL-23p19 mRNA的表达水平降低,但尚未达到有统计学差异(P>0.05),TGF-β1 mRNA表达水平无明显差异(P>0.05)。急性白血病患者血浆、骨髓上清IL-23水平与正常对照组相比无统计学差异。骨髓单个核细胞和MSCs共培养上清中IL-23水平下降,有统计学差异(P<0.05)。 结论:白血病患者骨髓单个核细胞中IL-23p19 mRNA表达无异常。在体外,MSCs可抑制急性白血病患者骨髓单个核细胞IL-23的表达,但不影响TGF-β1的转录水平。这可能是MSCs免疫调节作用的机制之一。
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