玫瑰花多酚提取、分离纯化及其生物活性研究

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我国玫瑰花资源丰富,大部分区域都有栽植。玫瑰花富含多种营养物质,本文采用云南丽江某公司的玫瑰花为材料,用超声波响应面优化辅助提取玫瑰花中的多酚,用大孔树脂对玫瑰花多酚进行初步分离提纯,所得产物的抑菌性和体外抗氧化性良好,所得的结果如下:(1)乙醇体积分数(0、40、60、80、99)、超声波温度(30、40、50、60、70)、超声波功率(200、300、400、500、600)、料液比(1:15、1:20、1:25、1:30、1:35)和超声时间(10、15、20、25、30)5个因素对玫瑰花多酚得率的影响,通过数据分析后选取因素来进行响应面优化实验,得到的最优条件为:料液比为1:27 g/m L,超声功率550 W,乙醇体积分数为50%,在此前提下,玫瑰花多酚得率为0.956%。(2)从7种极性和粒径比有差异的大孔树脂中筛选,通过吸附、解吸试验得出D101型大孔树脂是对玫瑰花多酚纯化效率最好的提纯树脂,其附着率是96.46%,解析率是53.06%。通过静态和动态的吸附、解吸试验,确定玫瑰花多酚的最佳纯化工艺为:上样质量浓度2.5 mg/m L,p H为3.0,乙醇体积分数80%,上样流速2 m L/min,洗脱液体积为160 m L,纯度由17.16%提高到58.12%,纯度变为原来的3倍。(3)对纯化前的玫瑰花粗提液、纯化后的玫瑰花多酚、TBHQ及VC的抗氧化能力进行测定,发现4种样品对DPPH的清除率大小为:纯化前多酚粗提液(59.76%)<TBHQ(65.41%)<纯化后多酚(73.67%)<VC(95.71%),纯化前多酚粗提液的IC50值为65.59μg/m L,纯化后多酚的IC50值为38.66μg/m L,TBHQ的IC50值为51.12μg/m L,VC的IC50值为20.47μg/m L。对羟自由基的清除率分别为纯化后(98.21%)、纯化前多酚粗提液(13.06%)、VC(10.59%),纯化前多酚粗提液的IC50值为282.71μg/m L、VC的IC50值为304.79μg/m L;对ABTS+的清除率分别为纯化前多酚粗提液(90.28%)<VC(93.85%)<纯化后(95.29%),纯化前多酚粗提液的IC50值为32.92μg/m L,纯化后多酚的IC50值为14.92μg/m L,VC的IC50值为18.86μg/m L;玫瑰花多酚总还原力的测定:纯化后多酚粗提液>纯化前多酚>VC。得到的多酚溶液呈紫红色,溶液清澈无杂质。从以上结果可以看出,纯化前后玫瑰花多酚与VC的体外抗氧化性能力对比中可知,纯化后玫瑰花多酚的抗氧化能力明显增强,多酚质量浓度越大,抗氧化能力就越强。(4)玫瑰花纯化前多酚对7种实验菌表现出不同的抑制作用。其中,玫瑰花多酚对细菌有良好的抑制作用,对真菌没有表现出抑制作用;纯化后的多酚在相同浓度下对上述菌也有抑制作用,且抑制作用比纯化前多酚强。玫瑰花多酚有良好的抑菌性,其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、沙门氏菌(Salmonella enteriditis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、李斯特菌(Listeria monocytogenes)和枯草芽苞杆菌(Bacillus subtilis)的最低抑制浓度分别为3.75、1.00、5.00、2.00、4.28 mg/m L。与山梨酸钾对比,玫瑰花多酚的抑菌性强于山梨酸钾。通过温度和p H实验,玫瑰花多酚对温度和p H敏感,高温度下玫瑰花多酚也具有较强的抑菌作用;玫瑰花多酚在酸性条件下的抑菌作用稳定,在碱性条件下的抑菌作用不稳定,且抑菌作用比在酸性环境弱。
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