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目的:HOX基因家族是同源异形盒基因中的一大类,不仅编码转录因子而调控细胞增生和分化,而且与人类多种恶性肿瘤的发生、发展及预后有关。HOXA1是HOX基因家族的成员之一。课题组前期研究发现HOXA1在胃癌组织中表达明显增高,本课题在此基础上,进一步研究HOXA1在胃癌中的表达情况及其可能的作用机制。方法:首先采用Real-time PCR、Western blot检测胃癌组织中HOXA1的mRNA及蛋白表达情况。其次,构建HOXA1表达下调的稳转胃癌细胞株,研究HOXA1敲减对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。然后,采用Real-time PCR、Western blot分析胃癌组织中cyclin D1的m RNA及蛋白表达情况。最后,构建组织芯片检测胃癌中HOXA1和cyclin D1的表达情况,结合相关临床病理资料,通过COX比例风险回归模型和Kaplan-Meier生存曲线来分析HOXA1和cyclin D1的表达在胃癌的临床意义。结果:1、Real-time PCR、Western blot检测发现胃癌组织中HOXA1的m RNA及蛋白水平显著增高。2、课题组选用SGC-7901和BGC-823胃癌细胞,成功构建HOXA1表达下调的稳转胃癌细胞株。HOXA1表达下调后,CCK-8检测发现胃癌细胞的增殖能力减弱,平板克隆形成实验发现胃癌细胞体外克隆形成能力减弱,transwell迁移和侵袭实验发现胃癌细胞的迁移和侵袭能力受到明显抑制。裸鼠成瘤实验发现HOXA1表达下调显著抑制胃癌细胞的体内成瘤能力。另外,HOXA1表达下调后,细胞周期检测提示胃癌细胞发生G1期阻滞现象,同时,Ed U掺入实验也发现胃癌细胞DNA复制活性显著降低,S期细胞显著减少。Western blot实验进一步发现HOXA1表达下调后,cyclin D1表达下调,提示HOXA1可能通过cyclin D1调控细胞周期,进而发挥促癌作用。3、Real-time PCR、Western blot检测发现胃癌组织中cyclin D1的m RNA及蛋白水平显著增高。同时,我们发现HOXA1和cyclin D1的表达呈正相关。COX比例风险回归模型发现HOXA1是胃癌总体生存率(OS)和无病生存率(DFS)的独立危险因素。Kaplan-Meier生存曲线分析发现HOXA1、cyclin D1阳性表达患者预后较差。随后分析了HOXA1与cyclin D1联合应用在胃癌预后判断中的意义,结果发现与HOXA1和cyclin D1均阴性表达、HOXA1或cyclin D1单一阳性表达的患者相比,HOXA1和cyclin D1均阳性表达的患者的OS和DFS最低。结论:HOXA1在胃癌组织中表达升高,具有促进胃癌恶性生物学行为的作用。HOXA1可能成为一个新的胃癌预后判断标志物,同时HOXA1和cyclin D1联检对于判断胃癌预后更有意义。