华支睾吸虫囊蚴cDNA文库的构建与免疫学筛选

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华支睾吸虫(Clonorchis sinensis)是一种典型的以复殖吸虫生活史为主的寄生虫。华支睾吸虫病(Clonorchiasis)是由华支睾吸虫(Clonorchis sinensis)引起的一种人兽共患寄生虫病。其成虫寄生在人的肝胆管内,所引起的疾病以肝胆病变为主。目前全世界估计有3,500万人感染华支睾吸虫,其中有1,500万分布在中国,集中分布于中国的南方和东北地区。目前我国已成为华支睾吸虫病危害最为严重的少数几个国家之一。但是到目前为止还没有理想的诊断与防治方法应对该病,感染率呈明显的持续上升趋势。主要原因除了与还没有研制出有效的针对该病的防治疫苗有关之外,同时也与还没有找到理想的诊断措施以协助控制传染源、切断传播途径有关。本次研究以我国华支睾吸虫病流行地区吉林省白城地区镇赉县四方坨子六分场鱼塘收集的鱼为实验动物,从中分离的华支睾吸虫囊蚴为实验材料,利用λZAP Express cDNA合成试剂盒,成功地构建了高质量的华支睾吸虫囊蚴时期的cDNA表达文库。运用免疫学筛选的方法对该文库进行筛选,最后获得15个阳性克隆,测序之后得知所筛选出的克隆所对应的基因序列,进行序列分析。希望能够筛选出华支睾吸虫囊蚴时期特异性,高反应性的基因,从而为研究华支睾吸虫囊蚴期特异性的功能抗原奠定基础,为华支睾吸虫病的早期诊断以及预防提供理论依据。
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