【摘 要】
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血脑屏障(BBB)是隔离中枢神经系统与外周组织的生理性屏障,大多数的小分子物质和几乎所有的大分子物质都无法穿越BBB入脑。因此BBB是中枢神经系统药物开发的主要限制因素。由
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血脑屏障(BBB)是隔离中枢神经系统与外周组织的生理性屏障,大多数的小分子物质和几乎所有的大分子物质都无法穿越BBB入脑。因此BBB是中枢神经系统药物开发的主要限制因素。由于在体状态下对BBB的研究存在技术困难,建立BBB体外模型(BBBM),对中枢神经系统药物的研发有重要意义。本文的目的在参阅文献的基础上,建立一种由脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞共培养,具有良好的形态和结构功能,便于大量培养和复制的体外血脑屏障模型。实验方法:首先,通过匀浆,过滤,密度梯度离心,胶原酶消化等步骤分离SD新生大鼠的脑微血管内皮细胞进行培养,第二步,分离大鼠大脑皮质中的星形胶质细胞进行培养,最后,将两种细胞分别接种于多孔滤膜的两面进行共培养。模型建立后,通过跨细胞膜电阻(TEER)的测量以及通透性测试等对模型的功能特点进行评估。实验结果:(1)对分离的脑微血管内皮进行了形态观察,并对生长曲线进行了测定,细胞在培养7—9天后显示了典型的“铺路石”样形态并形成细胞单层。(2)星形胶质细胞显示了良好的生长形态和胶质纤维酸性蛋白GFAP)表达。(3)两种细胞共同培养建立的血脑屏障模型显示了较低的通透性和较高的跨细胞膜电阻(TEER)。结论:通过脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞的共培养,可建立符合生理,药理学研究要求的高质量体外血脑屏障模型。养,可建立符合生理,药理学研究要求的高质量体外血脑屏障模型。
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