沙利度胺对大鼠实验性结肠炎血管内皮生长因子表达的影响

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目的通过TNBS诱导大鼠实验性结肠炎,观察沙利度胺对该大鼠实验性结肠炎的疗效及对VEGF表达的影响。方法60只SD大鼠称重编号,随机分为正常对照组(A组,n=10)和实验组(n=50),实验组大鼠通过5%TNBS(100mg/kg)/无水乙醇混合溶液(V1/V2为2/1)灌肠建立实验性结肠炎模型,然后再分为结肠炎组(E组,n=10)、英夫利昔组(Y组,n=10)、沙利度胺组(S组,n=10)、美沙拉嗪组(M组,n=10)、沙利度胺联合美沙拉嗪组(F组,n=10)。造模后24小时开始药物干预,A组与E组予NS 4ml/kg灌胃,S组予沙利度胺(200mg/kg)/NS 4ml/kg灌胃,Y组予英夫利昔(5mg/kg)/NS 10mg/ml腹腔注射,M组予美沙拉嗪(100mg/kg)/NS 4ml/kg灌胃,F组予美沙拉嗪(100mg/kg)+沙利度胺(200mg/kg)/NS 4ml/kg灌胃。每天1次,连续14天后深度麻醉处死大鼠,留取标本。行DAI、CMDI、TDI评分,免疫组织化学方法检测结肠组织中NF-k Bp65、VEGF水平,ELISA法检测血清中VEGF浓度。结果1.实验组大鼠TNBS/乙醚混合液灌肠后可出现粘液、血便,甚至大量肉眼粘液血便,大便松弛甚至水样便,进食量减少,体重增长减慢。药物治疗组腹泻次数逐渐减少,无肉眼血便,仅部分隐血阳性,进食量增多,体重逐渐增加,总体优于结肠炎组,劣于正常对照组,仅E、Y、M组出现死亡,死亡率分别为20%、10%、10%,死亡原因为肠梗阻、肠穿孔。2.实验第15天处死所有大鼠后行DAI、CMDI、TDI评分,测定结肠组织NF-k Bp65、VEGF免疫组化积分及血清VEGF浓度,E与A组相比,上述指标显著性升高(p<0.05),S、Y、M、F与E组相比显著性降低(p<0.05),S与F组组间差异无统计学意义(p>0.05)。S与Y、S与F、Y与F组间DAI(S组0.83±0.72、Y组0.67±0.78、F组0.77±0.74,t=0.53、0.21、-0.31,p=0.61、0.83、0.76)、CMDI(S组2.30±1.16、Y组2.11±1.27、F组2.10±0.99,t=0.38、0.41、0.02,p=0.71、0.68、0.98)、TDI(S组2.70±0.95、Y组2.44±0.88、F组2.50±1.08,t=0.59、0.47、-0.13,p=0.56、0.64、0.90)无显著性差异。DAI示S与M组间无显著差异(0.83±0.72 vs 1.22±0.78,t=-1.22,p=0.24),CMDI、TDI示S与M组间存在显著差异(2.30±1.16、2.70±0.95 vs3.56±1.33、3.89±1.05,t=-2.52、-2.70,p=0.02、0.01)。S与Y结肠组织NF-k Bp65无显著性差异(2.60±1.26 vs2.33±1.22,t=0.48,p=0.64),VEGF显著降低(2.50±1.08vs3.89±1.27,t=-2.67,p=0.01)。Y与M相比,结肠组织NF-k Bp65、VEGF表达显著降低(2.33±1.22vs4.22±1.64,3.89±1.27vs5.11±1.62,t=-3.26、-2.26,p=0.00、0.03)。S与Y相比,血清VEGF浓度表达显著降低(21.48±1.47 vs 31.85±4.29,t=-3.57,p=0.00)。Y与M相比,血清VEGF浓度显著降低(31.85±4.29 vs 74.39±11.41,t=-14.28,p=0.00)。结论(1)经5%TNBS(100mg/kg)/无水乙醇混合溶液(V1/V2为2/1)灌肠可诱导出大鼠CD模型。(2)沙利度胺疗效优于美沙拉嗪,与英夫利昔相当,沙利度胺联合美沙拉嗪并没有更多降低DAI、CMDI、TDI评分及NF-k Bp65、VEGF表达。(3)沙利度胺具有较强的抗炎和抗血管生成作用,其降NF-k Bp65能力与英夫利昔相当,降VEGF能力优于英夫利昔。
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