目的观察缺氧/复氧对大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK-52E）的损伤以及对模式识别受体NALP3蛋白表达的影响。并通过构建NALP3-siRNA抑制大鼠肾小管上皮细胞NALP3的表达，探讨其对缺氧/复氧诱导细胞凋亡的保护作用及其机制。方法（1）利用三气培养箱调整氮气压力条件形成缺氧条件，缺氧1h，分别复氧1h、2h、4h、8h、16、24h后收集细胞和培养上清液。胎盘蓝摄取法进行活细胞计数，并检测培养上清液中的乳酸脱氢酶（LDH）含量以及细胞NALP3蛋白的表达。（2）根据大鼠NALP3全长基因序列设计并合成NALP3-si-RNA质粒，转染大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)，以无关siRNA转染组作为对照。用Western印迹法检测转染细胞NALP3蛋白的表达。（3）将细胞分为正常对照组、H/R组、无关siRNA转染组和NALP3-siRNA转染组。利用三气培养箱调整氮气压力形成缺氧条件，缺氧1h复氧4h后检测培养液上清LDH的含量和细胞NALP3蛋白的表达（。4）采用Annexin V/IP染色结合流式细胞仪检测细胞凋亡率；Western印迹法检测细胞IκB-α、Bax和Bcl-2蛋白的表达；EMSA检测NF-κB DNA结合活性。结果（1）与对照组相比，NRK-52E缺氧/复氧后LDH升高（p<0.05），活细胞计数和细胞存活率较对照组显著下降（p<0.05），细胞NALP3表达逐渐增加，在复氧4h达到高峰。（2）特异性NALP3-siRNA能有效抑制NRK-52E的NALP3表达，与无关siRNA转染组相比，NALP3-siRNA转染组NALP3蛋白表达水平明显下调（p<0.05）。（3）经缺氧复氧后，NRK-52E细胞培养上清液中LDH含量和NALP3蛋白表达表达显著增加。与无关siRNA相比，LDH含量和NALP3的表达有显著下降（P﹤0.05）。（4）与对照组相比，H/R后细胞IκB-α磷酸化和降解以及NF-κB DNA结合活性增加，细胞NALP3、Bcl-2和Bax蛋白的表达明显上调，而NALP3-siRNA转染组细胞IκB-α蛋白的降解，NF-κB DNA结合活性以及Bax / Bcl-2蛋白的比值均低于无关siRNA转染组（均P﹤0.05）。同时，与对照组相比各组细胞凋亡率明显增多，其中NALP3-siRNA转染组细胞凋亡率明显低于无关siRNA转染组（均P﹤0.05）。结论H/R使肾小管上皮细胞内NALP3蛋白表达明显上调。NALP3-si-RNA能够显著抑制肾小管上皮细胞内NALP3的表达，对肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤有一定的保护作用。其机制可能通过抑制NALP3表达，对NF-κB的活化以及Bcl-2和Bax蛋白表达的不同调控，减少细胞的凋亡。