骆驼尿液蛋白质及代谢组学分析及其对CCl4诱导小鼠肝损伤保护作用的研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yumenglu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
肝脏是代谢内源性和外源性物质的重要器官,多种刺激因素(如病毒感染、肝毒性物质或肝脏缺血再灌注等)均可引起急性肝功能不全,而长期反复的损伤会引起慢性肝损伤进而导致肝纤维化、肝硬化甚至肝癌和肝衰竭。因此,预防和控制肝损伤的发生和发展对肝病的治疗具有重要的临床意义。骆驼尿液具有抗癌、抗菌、抗血小板等活性,可以用于治疗和预防癌症、肝损伤、痢疾等疾病。目前关于骆驼尿液抗肝损伤作用机理的研究较少。因此,本研究首先通过蛋白质组学及代谢组学技术全面揭示骆驼尿液蛋白质及代谢物的组成及其功能。其次,利用CCl4建立小鼠急性和慢性肝损伤模型,通过对小鼠血清生化指标(ALT、AST和TBA)、肝脏抗氧化应激指标(MDA、GSH、SOD、CAT和GSH-px)和组织病理学分析,并结合小鼠肝脏转录组学分析研究骆驼尿液对肝损伤的保护作用及其分子机制。本研究不仅为进一步揭示骆驼尿液的抗肝损伤作用机理提供了理论基础,还将为后续筛选和开发骆驼尿液抗肝损伤活性组分和制品奠定了基础。主要研究结果如下:(1)通过LC-MS质谱测定骆驼尿液蛋白质组,共鉴定出827个蛋白质。GO功能分析发现,有357个蛋白质参与免疫系统过程;27个蛋白质参与排毒过程;27个蛋白质具有抗氧化活性。而KEGG通路分析发现这些蛋白质主要参与补体和凝血级联通路(54个蛋白)、PI3K-Akt信号通路(47个蛋白)和溶酶体(43个蛋白)等信号通路。其中有一些高丰度蛋白质参与免疫应答或具有抗菌活性,从而起到保证尿液的无菌性。与此同时,在参与排毒过程的27个蛋白质中主要为谷胱甘肽代谢相关蛋白;此外,还有一些具有抗氧化活性的蛋白质如(SOD、GSH、PRDX和GPX等)。结果表明,这些具有抗氧化和解毒功能的蛋白质与骆驼尿液的抗氧化活性相关。(2)通过LC-MS进行骆驼尿液的非靶向代谢组检测分析,共鉴定出245个可信度高的代谢物,包括了氨基酸,脂肪酸,小分子羧酸等。其中含有一些具有生物活性的代谢物质,包括:原儿茶酸,间苯二酚、胆酸、右旋布洛芬等。据研究报道,这些化合物具有抗氧化,抗菌,抗炎,抗痉挛和抗癌等作用。此外,原儿茶酸、甜菜碱、紫苏醇以及姜油酮具有不同程度的保肝护肝的作用。结果提示这些活性代谢物在骆驼尿液抗肝损伤活性中起到一定作用。(3)在急性肝损伤研究中,通过对小鼠生化指标检测和组织病理学分析,发现与模型组比较,驼尿组血清ALT、AST、TBA、炎症因子(IL-1β,TNF-α和IL-6)和肝脏MDA水平显著降低,而肝脏SOD活性和GSH水平显著升高,提示骆驼尿液能够抑制肝脏脂质过氧化物及促炎因子的产生。通过转录组测序发现,驼尿组与急性肝损伤模型组的1790个差异基因显著富集到MAPK信号通路、胆汁酸分泌通路、谷胱甘肽等41条通路中。尿组GPX7、Pdia5、Pdia4、Ggt、Anpep、Idh1和Nat8的m RNA表达显著增加,提示骆驼尿可能是通过促进谷胱甘肽的合成,提高小鼠肝脏抗氧化能力从而起到抗氧化应激作用。此外,在驼尿组中胆汁酸分泌相关14个基因的表达被逆转。提示骆驼尿液可能是通过抑制FXR和SHP的过度下调和进一步调节转运体的表达改变胆汁酸的合成和转运,从而起到保护肝脏的作用。研究结果表明,骆驼尿液通过促进谷胱甘肽合成和代谢、调节胆汁的分泌和转运起到缓解CCl4诱导的小鼠肝损伤及脂质过氧化反应的作用。(4)在慢性肝损伤研究中,小鼠生化指标结果显示骆驼尿液能够有效改善CCl4引起的ALT与AST水平紊乱、提高肝组织抗氧化能力。同时组织学分析结果显示,驼尿处理显著减少CCl4引起的胶原沉积和细胞凋亡,改善肝脏组织学形态,可减轻肝损伤程度及预防肝纤维化的形成。转录组学分析结果显示,714个差异基因显著富集到Cell cycle、ECM-receptor interaction、Glutathione metabolism等14条通路中。骆驼尿液显著抑制了肝脏ECM-受体相关8个基因以及细胞周期相关基因(cyclins A1,cyclins B1,cyclins B2和CDK1)的m RNA表达。结果表明,骆驼尿液通过抑制HSC的活化使其阻滞在G2/M期从而减少肝组织中胶原的积累,起到预防和治疗肝纤维化的作用。
其他文献
中央广播电视总台百集特别节目《美术经典中的党史》将党史和美术巧妙地结合在一起,使节目内容具有多样化创意表达的特点;形式上则发挥媒体融合优势进行沉浸式传播,注重情感化和共情力的传播效果,实现了视觉场的美学创新和对受众核心价值观的培育引导,推动了党史理论传播深入人心。
在以党史教育为主题的理论节目中,《美术经典中的党史》打破传统模式,创新了节目的阐释语态。节目借助美术这一大众化艺术方式在"静"与"动"的双重视觉书写中,激活了党史教育的灵动性;在档案化的媒介记忆实践中,全景再现党的革命历史和光辉岁月,深化了对党史的认知;依凭故事叙事与空间建构引领了党史的文化价值,实现了民族精神的凝聚。
胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)是一种最常见的原发性中枢神经系统肿瘤,具有迅速切换迁移模式的特性,阻断GBM的侵袭极具挑战性,寻求能够阻断多种迁移模式的药物是亟待解决的问题。前期我们的研究发现一种内源性芳基烃受体(Aryl Hydrocarbon Receptor,AHR)激动剂,小分子2-(1H-吲哚-3-羰基)-噻唑-4-羧酸甲酯(2-(1H-indole-3-carbonyl
本研究分别对广西、山西和内蒙古地区98份农家自制酸粥细菌群落结构、理化营养品质及二者关联性进行了解析,同时使用传统微生物学与分子学技术相结合的手段对其中优势菌属进行了分离鉴定及保藏,并对分离出的罗伊氏乳杆菌开展了比较基因组学与多位点序列分型研究,以探究菌株对环境的适应性。为初步探究酸粥发酵过程中风味形成机制,本研究在对分离出的可食用菌株进行生长特性、发酵特性筛选的基础上进一步使用非靶向代谢组学监控
鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)属疱疹病毒科α疱疹病毒亚科,可引起鸡的传染性喉气管炎。早在1925年美国首次报道鸡传染性喉气管炎以来,在上世纪六十年代我国也发现了该病,相继在我国各省均有发生,该病是目前危害养禽业的重要疫病之一。国内外主要使用弱毒疫苗预防该病,但因疫苗株毒力普遍偏强,因此存在潜伏感染的危害以及无法鉴别疫苗株与野毒
大肠杆菌性腹泻是致死率较高的一种传染病,造成严重畜牧业经济损失。蒙药巴布-7(Babu seven compound,BBS)对腹泻有较强的临床疗效。但BBS对大肠杆菌性腹泻肠道屏障功能的研究较少。为研究BBS对大肠杆菌性腹泻肠道屏障功能的影响。本研究开展如下实验:实验1:为建立大肠杆菌性腹泻模型,将90只小鼠分为空白对照组(VG,口腔灌服生理盐水,n=10),模型Ⅰ组(MGⅠ,腹腔注射1.0×1
巨噬细胞是先天免疫系统的高度可塑性细胞,参与多种病理进程,对许多毒性刺激诱导的氧化应激、炎症和凋亡具有高度的抗性。酿酒酵母β-葡聚糖已被证明是一种有效的免疫增强剂,课题组前期研究证实其可降低肉羊机体氧化应激。本研究首先利用LPS诱导RAW264.7细胞建立氧化应激和炎症反应模型,初步证实酿酒酵母β-葡聚糖的抗氧化作用。然后,在氧化应激模型基础上,探究酿酒酵母β-葡聚糖对RAW264.7细胞抗氧化、
多能干细胞(Pluripotent stem cells,PSCs)在成年个体中具有向所有细胞类型分化的潜力,具有无限的自我更新能力。哺乳动物多能干细胞通常被分为三种类型:胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)、诱导多能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPSCs)和成体多能干细胞。诱导并建立乌骨绵羊iPSCs可为摸索绵羊ESCs体外培
A型流感病毒经常给养殖业带来严重经济损失,同时影响人类健康。研究报道H9N2流感病毒可以感染禽、猪和人,其研究具有重要的公共卫生学意义。流感病毒的致病机制目前普遍认为由于病毒的有效复制带来的直接损伤、病毒所致炎性因子的大量释放和氧化应激损伤造成的,但其详细机制仍需进一步研究。研究证实流感病毒可以诱导细胞自噬,但其在流感病毒致病机制中的作用尚不明确。因此本研究探讨了细胞自噬在流感病毒致病机制中的作用
尼泊金甲酯(Methylparaben,MeP)是国际上广泛使用的广谱高效防腐剂,现被全球主要国家应用于食品、化妆品和医药品中。MeP的大量使用造成其在环境中和人以及动物体内的高浓度存在。流行病学调查报道MeP的暴露与人和伴侣动物患糖尿病的风险有关,但对于MeP是否能够干扰胰岛β细胞功能的研究鲜有报道。因此,本研究分别开展了短期暴露MeP对CD-1小鼠β细胞的影响和MeP对CD-1小鼠胰腺和βTC