【摘 要】
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研究背景冠心病（Coronary heart disease,CHD）的全球负担日益增加。急性心肌梗死是世界范围内死亡的主要原因。梗死血管再血管化是目前治疗急性心肌梗死的主要方法,但再血管化也会对心肌细胞造成额外的损伤,降低心肌再灌注的有益作用,甚至导致更为严重的心肌功能障碍,称为心肌缺血再灌注损伤（Myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI）。越来越多
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研究背景冠心病（Coronary heart disease,CHD）的全球负担日益增加。急性心肌梗死是世界范围内死亡的主要原因。梗死血管再血管化是目前治疗急性心肌梗死的主要方法,但再血管化也会对心肌细胞造成额外的损伤,降低心肌再灌注的有益作用,甚至导致更为严重的心肌功能障碍,称为心肌缺血再灌注损伤（Myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI）。越来越多的研究表明Sirt3,FoxO1和自噬在MIRI的过程中发挥重要的调控作用,但Sirt3-FoxO1-autophagy调控心肌缺血再灌注损伤的机制尚不清楚。目的探究Sirt3-FoxO1通路介导自噬在心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法慢病毒感染H9C2心肌细胞构建Sirt3过表达稳定株,构建缺血再灌注损伤模型。将实验分为三组,分别为正常对照（NC）组、缺血再灌注（IR）组,Sirt3过表达+缺血再灌注（S+IR）组,其中NC组H9C2心肌细胞不做特殊处理。采用Western blot检测Sirt3、乙酰化FoxO1（Acetylated forkhead box protein O1,Ac-FoxO1）、自噬标记蛋白Beclin1、LC3B及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达,流式细胞分析仪检测细胞凋亡情况。通过全自动生化仪检测LDH的值反映细胞损伤情况。结果IR组Sirt3的相对表达量低于NC组（P＜0.05）,S+IR组Sirt3的相对表达量高于IR组（P＜0.001）。IR组Ac-FoxO1的相对表达量高于正常对照组（P＜0.01）,S+IR组Ac-FoxO1的相对表达量低于IR（P＜0.001）,IR组自噬标记蛋白Beclin1、LC3B高于NC组（P＜0.01）,S+IR组Beclin1、LC3B表达高于IR组（P＜0.05）,IR组较NC组凋亡相关蛋白Bax表达升高（P＜0.001）,Bcl-2表达降低（P＜0.001）,S+IR组较IR组Bax表达减少（P＜0.01）,Bcl-2表达高于IR组（P＜0.05）。全自动生化仪检测LDH值,IR组高于NC组[（58.00±2.00）U/L、（14.00±2.65）U/L,（P＜0.001）],S+IR组低于IR组[（35.33±2.52）U/L、（58.00±2.00）U/L,（P＜0.001）]。IR组细胞凋亡率高于NC组[（20.76±1.94）%、（6.61±1.27）%,（P＜0.001）]。S+IR组凋亡率低于IR组[（11.36±0.74）%、（20.76±1.94）%,（P＜0.001）]。结论Sirt3在H9C2心肌细胞中促进自噬对心肌缺血再灌注损伤产生保护作用,其自噬水平的升高可能通过Sirt3-FoxO1通路介导。
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