人卵母细胞纺锤体的观测在人类辅助生殖领域的初步临床应用

来源 :第一军医大学 南方医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ct_1984tao1
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目的:(1) 探讨人纺锤体与第一极体的位置关系,以验证传统ICSI操作的安全性;(2)探讨纺锤体与人MⅡ期卵子正常受精、异常受精、卵裂以及第3天良好胚胎形成率的关系;(3)探讨早期卵裂与胚胎质量的关系以及MⅡ期人卵纺锤体存在与否与早期卵裂的关系;(4)观察环境温度的改变对MⅡ期人卵纺锤体结构的影响。 方法:(1)36例因男性因素行单精子卵细胞浆内注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治疗的不孕妇女。用纺锤体成像系统(Polscope)观察获得的成熟(MⅡ期)卵子纺锤体的情况。未成熟(BⅤ期和MⅠ期)卵子在体外培养24~48h后观察体外成熟卵子的纺锤体情况。根据第一极体与纺锤体之间形成的角度分为0°,0~80°,80~100°以及>100°组。同时还比较了体内成熟卵和体外成熟卵纺锤体位置的差别。(2)在本中心接受ICSI治疗的50例因丈夫男性因素就诊的不孕妇女,取卵后用纺锤体成像系统观察MⅡ期卵子纺锤体的存在情况,ICSI后16~20h后在倒置显微镜下观察受精情况。于取卵后第3天的上午评价胚胎质量。将卵裂球数目>6个,碎片≤20%,卵裂球无明显大小差异,无多核卵裂球的胚胎定义为良好胚胎。比较有无纺锤体组卵子的正常受精率、异常受精率、卵裂率以及良好胚胎形成率。(3)于ICSI后25~27h观察卵裂情况。若此时出现了卵裂就认为该受精卵发生了早期卵裂(early cleavage,EC)。比较有无早期卵裂组的良好胚胎形成率以及早期卵裂与MⅡ期卵子纺锤体的关系。(4)40例非男性因素的不孕妇女,将常规IVF后未受精的MⅡ期卵子置于室温(23~25℃)下直至纺锤体消失。于纺锤体消失后,将卵子分入3个实验组:第1组为纺锤体消失以后立即复温组;第2组为纺锤体消失以后又在室温下静置smin再复温组;第3组为纺锤体消失以后又在室温下静置lomin再复温组。卵子复温后smin,10min,Zh分别观察纺锤体的复现情况。 结果:(1)体内成熟组40个卵子,体外成熟组35个卵子。处于0“组的体内、体外成熟卵分别占5.9%和7.7%,0~80“组分别占88.2%和88.5%,80一100“组均为0.0%;>100。组分别为5.9%和3.8%。选择同时有体内和体外成熟卵子的患者16例,体内成熟组第一极体与人MH期卵子纺锤体之间的角度(44.脸31 .1。)显著高于体外成熟组(25.处26.5“) (只0.001)。(2)正常受精率和良好胚胎形成率,观察到纺锤体组均显著高于未观察到纺锤体组(只0.05)。两组之间正常受精的卵子卵裂率无显著差异(乃0.05)。单原核和多原核的形成率因为例数较少,未进行比较。(3)早期卵裂与纺锤体存在与否的r,值为0.422,P二0.000。认为早期卵裂与MH期卵子纺锤体存在呈正相关。EC组的良好胚胎形成率(86.4%)高于NEC组(43.8%),差异有显著性份毛二0.001)。(4)20个未受精的Mll期卵子置于室温下smin内纺锤体均消失。立即复温组中的8个卵子复温以后均再次出现了MH期纺锤体。静置smin组中的6个卵子复温以后也均再次出现了MH期纺锤体。静置10min组中的6个卵子只有3个卵子再次出现了MH期纺锤体。对照组的18个卵子放置于37oC恒温板上观察30min,纺锤体均未见消失。 结论:(l)大多数MH期人卵第一极体的位置都不能精确推测纺锤体的位置。传统的工CSI操作基本是安全的。当然,在纺锤体成像系统观测下行工CS工将更为安全。(2)观察到纺锤体的Mll期卵子具有更高的正常受精率和D3天良好胚胎形成率。 (3)出现早期卵裂的胚胎D3天良好胚胎形成率高。早期卵裂与纺锤体存在与否有较为密切的关系。(4) MH期卵子纺锤体对环境温度的改变非常敏感。温度降低将导致纺锤体消失,随着时间的延长,纺锤体复现几率明显减少。
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