论文部分内容阅读
目的:免疫检查点是免疫疗法的热点之一。研究表明,错配修复(mismatch repair,MMR)蛋白缺失的患者是免疫检查点抑制剂治疗的优势人群。淋巴细胞活化基因3(lymphocyte activation gene-3,LAG-3)是表达在T细胞表面的免疫检查点分子,LAG-3在结直肠癌中的表达增高与MMR缺失相关,但在子宫内膜样腺癌中未见报道。叉头状转录因子3(Forkhead box P3,FoxP3)是调节性T细胞的标志性分子。LAG-3~+FoxP3~+调节性T细胞在多种实体瘤中表达增加,并与肿瘤的不良预后相关,但在子宫内膜癌中少见报道。本研究观察子宫内膜样腺癌组织中LAG-3、FoxP3与MMR蛋白表达水平及与临床病理特征的相关性;探讨LAG-3与MMR蛋白表达的相关性,以说明MMR缺失子宫内膜癌患者是否为抗LAG-3免疫治疗的优势人群。方法:选择2016-2017年间有完整临床病理资料的子宫内膜样腺癌203例,用免疫组化的方法检测MMR蛋白表达情况;并在其中选取36例MMR蛋白表达缺失(deficient in MMR,dMMR)的病例与36例MMR蛋白完整表达(proficient in MMR,pMMR)病例按照1:1配比组成配对资料72例,选取的病例在年龄,肿瘤发生的部位,大小,组织学分级之间差别无统计学意义;用免疫组化的方法检测FoxP3和LAG-3的表达情况;分析两者表达与MMR表达、肿瘤浸润淋巴细胞数目、肿瘤大小、弥漫性生长方式、组织学分级、淋巴结转移之间的相关性;分析FoxP3和LAG-3二者表达的相关性;免疫荧光的方法检测FoxP3和LAG3的亚细胞定位;并利用TCGA数据库分析FoxP3、LAG3及MMR蛋白在内膜癌中的表达。结果:(1)本研究中203例子宫内膜样腺癌中dMMR病例共56例(27.6%)。dMMR内膜癌发生部位多位于子宫角,呈局限性生长方式(P<0.05);pMMR发生部位多位于子宫体布满宫腔内,呈弥漫性生长(P<0.05)。dMMR患者发病年龄较pMMR患者年轻,但是差异没有统计学意义。MMR表达情况与肿瘤浸润深度,组织学分级、淋巴结转移之间没有明显相关性(P>0.05)。(2)选取的dMMR病例与pMMR病例相比,LAG-3在肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)中以及在间质浸润淋巴细胞中表达增高,FoxP3在间质浸润淋巴细胞中高表达(P<0.01)。(3)LAG-3表达增高与肿瘤弥漫性的生长方式相关,肿瘤常布满整个宫腔(P<0.01)。FoxP3与LAG-3表达情况与肿瘤大小有关(P<0.01),与发病年龄、肿瘤部位、组织分化、浸润深度、淋巴结转移、ER、PR和P53无明显相关性。(4)LAG-3表达在淋巴细胞的膜表面,FoxP3表达在淋巴细胞的细胞核,二者表达有相关性(P<0.05)。免疫荧光证实两者存在同一细胞上的共表达。(5)TCGA数据库中分析MSI的病例MSS的病例相比LAG-3mRNA表达水平增高,LAG-3与FoxP3的mRNA表达正相关,LAG3 mRNA表达水平随肿瘤分期增高而增加,与患者预后没有明显相关性。结论:LAG-3蛋白在dMMR子宫内膜样腺癌组织内高表达,提示对dMMR子宫内膜样腺癌患者采用抗LAG-3治疗获益的可能性更大。LAG-3与FoxP3表达水平正相关,且二者在同一细胞共表达,推测LAG-3促进免疫逃逸的机制可能与FoxP3~+调节性T细胞有关。因此,dMMR子宫样腺癌患者可能是抗LAG-3治疗的优势人群;抗LAG-3免疫治疗的作用机制可能与FoxP3~+调节性T细胞有关。