中药续筋接骨方对骨折大鼠Wnt/β-catenin信号通路和IL-6、TNF-α的影响

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dingdang_2
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目的:中药续筋接骨方在临床上治疗骨折有着比较明显的效果,但是缺乏相关的现代医学的作用机制研究。本次实验通过检测骨折SD大鼠骨组织中Wnt/β-catenin信号通路的激活状态,了解中药接骨续筋丸在治疗过程中对该信号通路的调控作用。通过检测骨折SD大鼠血清炎性因子的水平,了解续筋接骨方对炎症的控制作用,探究其可能的作用机制,为该制剂的后续研究提供基础。材料与方法:选择健康的成年40只雄性大鼠,随机分成4组,每组10只,各组体重和年龄没有明显的差异。这些分组是:空白组,模型组,中药组,对照组。除了空白组外,所有大鼠采用麻醉后骨折模型支架复制股骨骨折模型。模型复制成功后,空白组和模型组均采用生理盐水10m L/(kg.d)处理,日一次灌胃。对照治疗组、中药组、造模后,分别用对照中成药和续筋接骨丸10m L/(Kg.d),日一次灌胃,所有组别均饲养30天。治疗结束后,用5%的乌拉坦溶液麻醉大鼠,剖腹后腹主动脉取血,低温离心取血清,用酶联免疫吸附法测定血清TNF-α、IL-6的含量。取大鼠的股骨骨折组织,一部分生理盐水浸润后,置于-80℃超低温冰箱保存,一部分用应用蛋白质印迹法Western Blot测定骨组织中Wnt/β-catenin关键蛋白的表达情况。结果:1.续筋接骨方明显改善了骨折大鼠的一般活动状态,大鼠体重的增加和其他组别相比出现明显的差异(P<0.05)。2.和正常大鼠相比,模型组大鼠血清TNF-α、IL-6的水平明显升高,(P<0.05)差异有统计学意义,出现了比较明显的炎症反应。经过30天的饲养观察后,所有大鼠炎症反应减轻,血清炎性因子指标TNF-α、IL-6的水平出现下降(P<0.05)。3.与正常大鼠相比较,骨折大鼠骨组织中的Wnt3a、β-catenin蛋白的含量明显升高(P<0.05)。经过治疗之后,信号通路中的Wnt3a、β-catenin蛋白的含量出现上调(P<0.05)。4.和对照组相比,用续筋接骨方中药的治疗组的关键蛋白含量上调水平最高,炎性因子抑制水平最低,和其他组别相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.续筋接骨方可以通过促进Wnt/β-catenin信号通路的激活表达,控制炎性因子的水平,达到促进骨折愈合的作用。2.续筋接骨方的疗效和对照药物对比,对炎性因子和Wnt/β-catenin信号通路的调控作用更加明显,呈现明显的优越性。
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