【摘 要】
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目的:研究SLP-2在人胃癌细胞中的表达与胃癌发生发展的关系,探索SLP-2的表达与胃癌细胞增殖凋亡之间的联系,寻找胃癌更深层次的发病机制和日后胃癌分子靶向治疗的方向,为胃癌的有效诊治、判断预后提供新的线索。方法:选取人正常胃粘膜上皮细胞GES-1和四种胃癌细胞AGS、NCI-N87、MKN-28、MKN-45,分别用RT-qPCR法和Western Blot法检测5种细胞中SLP-2mRNA和S
【基金项目】
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青海省科学技术厅； 青海省消化系统疾病临床医学研究中心；
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目的:研究SLP-2在人胃癌细胞中的表达与胃癌发生发展的关系,探索SLP-2的表达与胃癌细胞增殖凋亡之间的联系,寻找胃癌更深层次的发病机制和日后胃癌分子靶向治疗的方向,为胃癌的有效诊治、判断预后提供新的线索。方法:选取人正常胃粘膜上皮细胞GES-1和四种胃癌细胞AGS、NCI-N87、MKN-28、MKN-45,分别用RT-qPCR法和Western Blot法检测5种细胞中SLP-2mRNA和SLP-2蛋白的表达水平,明确人类胃癌细胞中SLP-2的表达情况;筛选SLP-2基因表达量最高的一种作为实验细胞,设计及构建SLP-2干扰载体转染细胞,通过RT-qPCR法和Western Blot法检测SLP-2的表达水平,验证干扰后的转染效率;再运用TUNEL染色对比观察干扰组细胞和对照组细胞的凋亡情况,以及流式细胞术检测干扰后与对照组相比的细胞凋亡率,最后采用CCK8检测细胞存活率以反应细胞增殖能力。结果:1.RT-qPCR检测显示:与GES-1相比,SLP-2 mRNA的表达量在胃癌细胞NCI-N87中显著升高,AGS的表达量没有显著变化,MKN-28和MKN-45的表达量略有降低;2.Western Blot检测显示:与GES-1相比,NCI-N87细胞的蛋白表达量显著升高,MKN-45细胞次之,AGS细胞的表达量没有显著变化,MKN-28的表达量显著降低;3.干扰SLP-2基因的表达后,与SLP-2 NC相比,SLP-2-si RNA-1和SLP-2-si RNA-2显著降低了NCI-N87细胞中SLP-2的表达水平,而SLP-2-si RNA-3显著上调SLP-2的表达水平,其中SLP-2-si RNA-2干扰效率最佳;3.TUNEL染色和流式细胞术结果均提示受到干扰后的SLP-2 si细胞组凋亡水平明显升高,CCK8检测结果提示干扰后的SLP-2 si细胞组存活率明显降低。结论:1.SLP-2对于胃癌的增殖有促进作用,并可抑制胃癌细胞的凋亡;2.SLP-2在人胃癌细胞中表达水平升高,表明其可能与胃癌的发生存在相关性。
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