苦参碱对人骨肉瘤细胞的增殖抑制及诱导凋亡的实验研究

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背景:骨肉瘤(osteosarcoma)是一种原发于骨组织的常见的恶性肿瘤,在原发骨肿瘤中,骨肉瘤的发病率居第二位,约占原发骨肿瘤的20%,仅次于浆细胞骨髓瘤,而且75%的病人在10~30岁,恶性程度高,严重影响青壮年身心健康。从上世纪70年代起,化疗药物开始应用于骨肉瘤患者,并且获得了显著的疗效。到了 80年代初逐步形成了新辅助化疗的概念。Rosen在1982年提出了新辅助化疗(Neoadjuvant chemotherapy)的概念,已成为骨肉瘤治疗的准则。但仍有许多临床治疗的难点,寻找新的,有效的化疗药物会有助提高骨肉瘤,骨肉瘤患者的生存时间。苦参碱(matrine,MAT)是从传统中药苦参(Sophora flavescens Ait)的根中提取出的一种活性物质,属于四环的喹嗪啶类,近些年研究发现,其在体外对多种肿瘤细胞具有增殖抑制、诱导凋亡、抑制肿瘤细胞黏附和转移、抑制和逆转肿瘤细胞的耐药性等作用,临床上也有一些苦参及苦参碱对白血病、肝癌和胃癌治疗有效的报道。目的:探究苦参碱体外诱导人骨肉瘤细胞株MG-63凋亡作用,为其在临床骨肉瘤治疗中的应用前景提供实验根据。方法:运用倒置显微镜观察人骨肉瘤细胞的形态改变。采用MTT比色法检侧不同作用浓度和不同作用时间苦参碱对MG-63细胞的增殖作用的影响,应用流式细胞仪分析不同浓度加药组和对照组第2天MG-63细胞周期的变化。结果:与对照组比较,0.4 mg/ml、0.8 mg/ml、1.2 mg/ml、1.6 mg/ml、2.0 mg/ml苦参碱作用2d后,能够使人骨肉瘤细胞体积减小,细胞核浆比例下降。苦参碱对MG-63细胞增殖拥有抑制功用,其增殖抑制作用伴随作用时间加长及药物浓度提高更为明显,具有时间和剂量依赖性。流式细胞仪检测可见通过苦参碱作用后G1期细胞比例增高,S期细胞比例降低,细胞阻滞在G1期,说明苦参碱对人骨肉瘤细胞周期的影响与药物浓度相关。结论:苦参碱具有对人骨肉瘤细胞MG-63的细胞毒性作用,其机制为抑制肿瘤细胞的增殖,影响细胞周期,使细胞阻滞于G1期,其作用具有时间和剂量依赖性。
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