基于光动力联合免疫治疗的纳米平台的制备及其应用研究

来源 :湖北大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tanjuan1980
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癌症一直以来都是危害人类身体健康的重大困扰之一,抗肿瘤的治疗也是目前正在研究的热点课题。而随着纳米医学的快速发展,构建具有多功能纳米载体从而能有效抑制肿瘤生长成为目前的主要研究方向。光动力治疗是一种重要的抗肿瘤治疗手段,相比于传统的放疗与化疗,其在选择性和微创性方面具有独特的优势。然而,由于光动力治疗的效力不足和肿瘤部位复杂免疫抑制微环境,导致光动力的抗肿瘤治疗难以达到理想的治疗效果。所以,本文通过纳米平台的构建,联合光热治疗或免疫治疗来提高光动力治疗的抗肿瘤治疗效率。首先,鉴于半导体材料Mo S2催化产生ROS的反应是一种非特异性反应(例如产生氢气,氧化和氧还原),因此根据相关文献报道,当在片层Mo S2中加入额外催化剂,会极大提高ROS的产生效率。因此,在第二章中我们构建了片层Mo S2包裹金纳米粒子平台(Au-Mo S2@chitosan),通过金纳米颗粒与片层Mo S2的复合,使该纳米材料不仅具有光热转换的能力,还能通过产生ROS作用于癌细胞,达到更佳的治疗效果。所得的Au-Mo S2@chitosan纳米粒子的粒径约为68 nm,具有较好的溶液稳定性和热稳定性。根据细胞的CCK-8检测表明,在暗处理条件下,Au-Mo S2@chitosan对细胞毒性较小,而在光照条件时,对癌细胞能起到较强的杀伤作用。在体外ROS检测实验中,也可以看出Au-Mo S2@chitosan具备产生一定量ROS的能力,联合其光热治疗,对癌细胞能起到更强的抑制作用。另外,基于光动力产生的ROS具有引发细胞的免疫原性死亡,从而能诱导机体的免疫应答,激活免疫治疗的能力,在第三章中,为了提高光动力治疗介导的ROS作用效率和免疫原性死亡水平,我们设计了一种血清蛋白涂层勃姆石(Al OOH)的有机-无机杂化纳米粒子,进而装载光敏剂二氢卟酚e6(Ce6)与蜂毒肽(MLT),简称为Ce6/MLT@SAB。根据相关数据分析,该纳米平台是粒径约为180 nm的棒状结构且粒径均一。与游离的MLT相比,Ce6/MLT@SAB可以明显减少细胞溶血性,同时具有MLT促进的光动力抗肿瘤作用。与Ce6@SAB相比,Ce6/MLT@SAB在体外和体内均可提高Ce6的癌细胞渗透率,从而在660 nm激光照射下,在细胞内产生的ROS含量得到明显提高。并且在经过光处理后,经过Ce6/MLT@SAB处理的细胞的免疫原性死亡程度和激活树突细胞的能力都得到了显著增强。在体外实验中,与对照组相比,在没有激光照射的情况下,多剂量注射Ce6/MLT@SAB的实验组,可以使肿瘤的生长率延迟60%以上,当与激光结合照射时,单次注射的Ce6/MLT@SAB实验组可以根除所治疗小鼠得到三分之一的皮下瘤。为了进一步研究其机理,Ce6/MLT@SAB光处理会增强免疫检查点封锁,进一步增强抗肿瘤作用,在肿瘤中产生了更多的CD4+和CD8+T细胞,同时减少了髓源性抑制细胞。
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