浙贝母质量标志物的初步发现及质量控制

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浙贝母是百合科植物浙贝母Fritillaria thunbergii Miq.的干燥鳞茎。具有抗炎清热化痰止咳,解毒散结消痈等功效。本文以浙贝母为研究对象,通过对不同产地浙贝母的指纹图谱和抗炎、化痰实验进行相关性分析研究,初步得到其抗炎和化痰作用的质量标志物,为后续浙贝母质量控制提供一定依据,主要研究内容如下:1.浙贝母的化学成分分析:采用UPLC-Q-TOF-MS技术,在正、负离子模式下,对10个产地浙贝母进行指纹图谱研究并鉴定其共有峰化学成分。共鉴定了贝母辛、西贝素、贝母素乙、贝母素甲、鄂贝啶碱、咖啡碱、苦鬼臼毒素、浙贝素、环巴胺等34个化合物。通过对结构裂解途径的归纳总结,主要裂解规律通常为H、CH3、H2O等一些小分子的丢失,为后续实验提供数据参考依据。2.基于抗炎和化痰药效模型的浙贝母生物评价研究:通过对ICR小鼠分别灌胃10个产地浙贝母不同给药剂量,进行抗炎和化痰实验,结果显示:抗炎效果由高到低依次为贵州兴义(圆个子)、浙江章水、湖南安化(硫熏)、浙江龙观、贵州兴义、浙江磐安、浙江舟山、贵州黔西南、江苏南通、浙江磐安(硫熏),且高剂量组药效优于低剂量组。化痰效果由大到小依次为浙江章水、贵州黔西南、贵州兴义(圆个子)、江苏南通、湖南安化(硫熏)、浙江龙观、贵州兴义、浙江磐安、浙江磐安(硫熏)、浙江舟山,且高剂量组药效优于低剂量组。3.浙贝母质量标志物的初步发现:采用双变量相关分析法和灰关联度分析法来研究其谱效之间的相关性,得到与药效相关的化学成分。结果显示,共有9个化学成分与抗炎作用相关,分别为:贝母素乙、贝母素甲、环巴胺、胡萝卜苷、polyphyllin V、苦鬼臼毒素、植物甾醇、ent-kaur-15-en-17-ol、ent-17-norkauran-16-one。有6个化学成分与化痰作用相关,分别为腺苷、贝母辛,西贝素、贝母素乙、贝母素甲、浙贝素。4.不同产地浙贝母中4种成分的含量测定:通过采用HPLC-ELSD法对不同产地浙贝母中4种活性成分(贝母辛、西贝素、贝母素乙、贝母素甲)进行含量测定。结果显示:贝母辛含量由高到低为贵州黔西南、贵州兴义(圆个子)、浙江章水、浙江磐安、浙江舟山、浙江龙观、浙江磐安(硫熏)、贵州兴义、江苏南通、湖南安化(硫熏),含量在0.186~1.1069 mg/g范围内;西贝素含量由高到低为贵州黔西南、浙江磐安、浙江磐安(硫熏)、浙江舟山、浙江章水、湖南安化(硫熏)、贵州兴义(圆个子)、浙江龙观、江苏南通、贵州兴义,含量在0.2047~1.2439 mg/g范围内;贝母素乙含量由高到低贵州黔西南、贵州兴义(圆个子)、浙江磐安(硫熏)、浙江磐安、浙江舟山、湖南安化(硫熏)、浙江章水、浙江龙观、贵州兴义、江苏南通,含量在0.0842~0.6115mg/g范围内;贝母素甲含量由高到低为贵州黔西南、贵州兴义(圆个子)、浙江磐安(硫熏)、浙江舟山、湖南安化(硫熏)、浙江章水、浙江磐安、浙江龙观、贵州兴义、江苏南通,含量在1.4585~11.7696 mg/g范围内。综上所述,本研究初步揭示浙贝母抗炎和化痰的质量标志物,为后续制定科学有效的质量控制标准及浙贝母的开发提供较为可靠的理论依据。
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