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多花水仙（Narcissus tazetta L.）鳞茎硕大,造型美观,气味清香,在我国已有上千年的栽培历史,是中国十大名花之一。目前多花水仙主要栽培区分布在福建、浙江以及上海等地。水仙花花期长短是影响水仙花观赏价值的主要因素,而乙烯是影响水仙花开放与衰老的主要因子之一。为探明乙烯在水仙花开放和衰老过程中的作用,福建是多花水仙的主产区,其中‘金盏银台’是福建多花水仙的主要栽培品种,自然条件下于春节前后开花。所以本研究以3年生‘金盏银台’水仙花为试验材料,利用ETD-300乙烯痕量检测仪测定了花期不同部位的乙烯释放量,并利用酶联免疫分析法测定了不同时期不同部位的ACC合成酶和ACC氧化酶的酶活性,从RNA-Seq数据中筛选出乙烯合成相关的10条基因,利用q RT-PCR技术分析了这10个基因在花朵4个时期的表达规律。主要研究结果如下:1、测定了对照组和3个处理组花朵4个时期不同部位的乙烯释放量。试验结果表明:对照组整花的乙烯释放量从花苞期到盛花期呈现下降趋势,在衰老期呈现上升趋势。处理组整花的乙烯释放规律为:花苞期到初花期,乙烯释放量呈现上升趋势,初花期到盛花期,乙烯释放量呈现下降趋势,在衰老期,乙烯释放量呈现上升趋势。在全花部位,在花苞期,对照组全花的乙烯释放量显著高于其他3个处理组,是1-MCP处理组的4.2倍,是烟熏处理组的6.35倍,是烟熏处理后1-MCP处理的12.7倍。在副冠部位,熏蒸处理或1-MCP处理都显著增加了初花期和盛花期的乙烯释放量,同时进行2个处理却会降低乙烯释放量,而在衰老期,烟熏处理和1-MCP处理都能降低乙烯释放量,其中1-MCP效果最为显著。在花瓣部位,对照组和3个处理组初花期和盛花期花瓣的乙烯释放量无显著性差异,而在衰老期,只进行熏蒸或者1-MCP的花瓣乙烯释放量显著增加。在子房部位,初花期1-MCP处理下的乙烯释放量最高。盛花期烟熏处理和1-MCP处理都能降低乙烯释放量,而烟熏后1-MCP处理组的乙烯释放量最低,衰老期1-MCP处理下的子房乙烯释放量最低。2、利用酶联免疫分析法测定了不同时期不同部位的ACC合成酶和ACC氧化酶的酶活性,试验结果表明:对照组的ACC氧化酶活性在花苞期和初花期相对稳定,在盛花期活性增加,在衰老期和盛花期无显著差异。只进行1-MCP处理的水仙花的ACC氧化酶活性在初花期显著增加,而在后3个时期无显著性变化。烟熏后1-MCP处理的水仙花ACC氧化酶的活性一直处在相对较高的水平,在盛花期和衰老期呈现上升趋势,这个处理的酶活性在花苞期和衰老期显著高于其他处理的酶活性。经过烟熏后1-MCP处理会显著提高水仙花全花ACC氧化酶酶活性。衰老期时,烟熏后1-MCP处理的水仙花副冠部位酶活性显著升高,1-MCP处理和烟熏后1-MCP处理的水仙花花瓣的ACC氧化酶活性显著提高。在全花部位,对照组的ACC合成酶活性呈现上升趋势,经过1-MCP处理的水仙花全花ACC合成酶活性在花苞期,初花期和盛花期3个时期中无显著差异,在衰老期酶活性显著下降。烟熏后1-MCP处理的水仙花ACC合成酶活性在花苞期和初花期无显著性差异,在盛花期酶活性降低,而在衰老期酶活性显著升高。在花苞期和初花期,3个处理组的水仙花ACC合成酶活性无显著性差异,在盛花期,烟熏后1-MCP处理的ACC合成酶活性显著下降,在衰老期,只经过1-MCP水仙花的ACC合成酶活性显著低于其他处理。3、采集对照组花苞期,初花期与盛花期的整花进行转录组分析,结果表明本次水仙花花朵转录组测序总共获得108 872条Unigene,总长度为880 804 45 bp,平均长度为809 bp。其N50的长度为1347bp,GC含量为40.78%。在NR比对注释中,匹配度最高的物种为芦笋。在所注释的191 846条信息中,生物学过程相关的Unigene序列数量为98 597条,占总体Unigene序列数量的51%;细胞组分相关的65 302条,占34%;分子功能相关的27 947条占14.5%。本次测序中Unigene主要注释到的途径有次生代谢产物的生物合成、核糖体、碳代谢、氨基酸的生物合成、内质网中的蛋白质加工、RNA转运等。本试验注释了大量水仙花发育衰老相关基因及转录因子,为后续开展延长水仙花花期的研究提供了丰富的数据资源。4、基于差异表达基因的KEGG分析,并结合NCBI数据库检索,筛选出与乙烯代谢显著相关的10条基因。利用q RT-PCR技术分析这10个基因在花蕾期、花苞期、盛花期和衰老期4个时期的表达规律,并对基因的表达量进行统计分析,并对基因表达量与乙烯释放量、酶活性进行相关性分析。试验结果表明:在空白处理中,与ACC合成酶显著相关的基因有Nt ACO1,与ACC氧化酶显著相关的基因有Nt ACO,Nt ACO3,Nt ACO4。在1-MCP组处理中,没有与ACC氧化酶显著相关的基因。与ACC合成酶显著相关的基因有Nt ACS1、Nt ACS1和Nt ERF060。在对照组、1-MCP处理组和烟熏后1-MCP处理组中,Nt ACO3、Nt ACO2和Nt ACO1表达量与乙烯释放量极显著相关,烟熏处理组的乙烯释放量与Nt ACS1和Nt ACS2表达量极显著相关,与Nt ACO表达量显著相关。Nt ACO4表达量,与1-MCP处理下的乙烯释放量相关。Nt ERF060表达量与空白处理下的乙烯释放量相关。