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微生物胞外多糖由于具有独特的理化性质和生物活性得到广泛研究和应用。微生物胞外多糖是一种生物大分子,其种类繁多、结构复杂、具有显著的微生物多样性和差异性,而且绝大多数微生物多糖资源及其理化特性和应用尚未得到开发和深入研究。因此,筛选和分离新型微生物并研究其所产胞外多糖的组分、结构和生物活性,对开发新型微生物多糖资源,获得具有潜在应用价值的微生物多糖及其衍生生物活性物质,具有较大的研究意义。本文从自然界中筛选获得两株产胞外多糖(EPS)的菌株并鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)与节状镰刀菌(Fusarium merismoides)。在分别对两株菌产EPS提取条件优化的同时,也对胞外粗多糖进行了分离纯化及其组分分析以及生物活性分析。论文的主要研究内容如下:(1)本文从地衣芽孢杆菌中分离到一种新型水溶性胞外多糖(EPS)。首先,采用响应面分析法(RSM),确定EPS提取的最佳条件。RSM分析表明,最适条件为乙醇浓度为79.22%(v/v)、温度为8°C、时间为10.44 h,EPS最大产率为3.07 g/m L。其次,采用DEAE-Sepharose快速柱层析法分离EPS,得到两种多糖组分:BL-P1和BL-P2。结构分析表明,BL-P1的分子量大于BL-P2,这是由于BL-P2中含有较高的甘露糖、核糖、葡萄糖醛酸、半乳糖、阿拉伯糖和果糖。此外,利用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和核磁共振光谱(NMR)对BL-P1与BL-P2多糖进行结构表征分析。结果表明EPS可能主要是由→3)-α-D-Galp-(1→3,5)-α-L-Araf-(1→,→3)-β-D-Glcp(1→,β-D-Glcp-(1→,→4)-β-L-Fucp-(1→4)-β-D-Xylp-(1→4)-α-L-Rhap(1→3)-β-D-Manp-(4→构成。在体外抗氧化活性测定中,EPS对羟基和1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基的清除能力呈剂量依赖性。并且,BL-P2对于α-淀粉酶α-葡萄糖苷酶抑制活性高于BL-P1。(2)本文发现节状镰刀菌胞外多糖(FM-EPS)分泌的新型胞外多糖,利用响应面法优化了提取条件。采用DEAE-Sepharose快速柱层析法分离得到F.merismoides A6胞外多糖(FM-ESP1和FM-EPS2)。单糖组成分析表明,两种馏分主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和核糖组成,平均分子量(Mw)分别为5.14×10~4和6.50×10~4 g/mo L。红外光谱和核磁共振光谱表明FM-ESPs主要是由→5)-β-D-Galp-(1→,→2)-β-D-Glcp-(1→β-D-Galf-(1→,→4)-β-L-Fucp-(1→4)-α-L-Rhap-(1→6)-β-D-Manp-(1→。体外抗氧化和抗增殖活性实验表明,FM-EPSs具有良好的抗氧化以及对He La和Hep G2细胞有较好的抗增殖活性。其中FM-EPS1比FM-EPS2具有更强的抗氧化活性,而FM-EPS2的抗增殖活性最强。因此,地衣芽孢杆菌胞外多糖与节状镰刀菌胞外多糖在食品、化妆品、医药等行业具有潜在的抗氧化、抗癌作用。