食品安全是受全世界关注的重要公共卫生问题,食源性致病菌导致的疾病对人类健康构成持续性威胁。沙门氏菌是最常见的食源性致病菌之一,其感染可引发伤寒,急性胃肠炎和菌血症等疾病其检测和鉴定对于预防食源性疾病具有重要意义。目前各国沙门氏菌检测的金标准是传统培养检测法,该方法稳定可靠但通常需要4天以上的检测时间,操作复杂且依赖专业操作人员。开发一种能够快速准确地检测沙门氏菌的检测方法对食品中沙门氏菌的检测具有重要意义。CRISPR系统是一种原核免疫系统,可降解外源核酸。Cas13a蛋白属于II型CRISPR-Cas系统,是CRISPR系统的效应因子之一,Cas13a蛋白与CRISPR RNA（cr RNA）结合后可以在其引导下靶向特定的RNA序列,与靶RNA结合后Cas13a蛋白的RNase活性被激活,其特殊的RNase活性可应用于分子生物学检测中。本研究将荧光报告分子与Cas13a蛋白反应结合验证其RNase活性,将PCR与Cas13a蛋白反应结合建立一种核酸检测方法,并将该方法用于沙门氏菌检测,同时探索该检测方法在沙门氏菌不同血清组分型检测中的应用。在大肠杆菌内诱导表达Cas13a蛋白,通过镍离子亲和层析和透析纯化后获得纯度为93.6%的Cas13a蛋白,蛋白浓度为332μg/m L。使用靶标RNA、cr RNA和荧光报告分子对重组表达的Cas13a蛋白的RNase活性进行验证。对Cas13a蛋白反应体系优化后用其检测RNA,最低检测限为10~1 p M靶RNA。将PCR与Cas13a蛋白反应结合建立PCR-Cas13a核酸检测方法,以沙门氏菌inv A基因为检测靶标并用该方法检测沙门氏菌,对沙门氏菌基因组的检测限为10~1 a M,且非沙门氏菌基因组未检出荧光信号,说明该检测方法特异性良好。加热沙门氏菌菌液后用PCR-Cas13a检测方法进行检测,结果显示该方法能检测到浓度为10~0 CFU/m L的沙门氏菌。在牛奶和果汁样品中具有相同的灵敏度。结合沙门氏菌血清组特异性检测靶标,使用PCR-Cas13a检测方法对不同血清组的沙门氏菌进行分型,结果显示血清组检测特异性良好,能够准确检测出不同血清组的沙门氏菌。用多重PCR代替PCR后对不同血清组沙门氏菌进行检测,仍显示出良好的特异性。综上,本研究基于Cas13a蛋白建立了一种核酸检测方法,并将其应用于沙门氏菌检测中。实验证明该检测方法灵敏度高且特异性强,能够应用于检测食品中沙门氏菌,并且结合特异性靶标可以对不同血清组的沙门氏菌进行分型检测。该方法的建立对沙门氏菌的预防、控制和研究具有积极意义。