亳白芍药材生产过程质量控制研究

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目的:1通过亳白芍产地调研,对亳白芍种质进行确认,以期确定亳白芍正品来源,指导亳白芍产地正确选择种质。2对亳白芍常见栽培品特征及质量进行调研,选出质量佳、产量高的亳白芍栽培品种,并明确纯化品种的必要性。3制定亳白芍规范化栽培操作规程,提升亳白芍质量。4探索亳白芍最佳切片厚度,探索产地将亳白芍切制为厚片的科学内涵。5对亳白芍产地加工与炮制一体化工艺应用的可行性进行研究,确认产地加工与炮制一体化加工出亳白芍饮片质量,使白芍饮片加工更加省时省力,且提升亳白芍质量。方法:1以HPLC指纹图谱和同时测定没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖及苯甲酰芍药苷含量的方法对传统芽头繁殖亳白芍及种子繁殖杂花白芍进行研究,并对七种成分含量进行聚类分析。2通过产地调研和文献研读对亳白芍不同栽培品特征及质量研究进行总结。3通过实地跟踪亳白芍选地、整地,芽头制作及栽培与管理等环节,走访药农,结合文献总结出亳白芍规范化种植操作规程。4通过对白芍药材切制为1.5 mm、2.2 mm、3.0 mm、3.5 mm厚饮片后各自厚度的碎屑率、下料率、翘片率以及不同厚度白芍饮片的干膏率、没食子酸等六种成分煎出率情况分析,结合损耗率及质量确定亳白芍适宜切制厚度。5通过对来源于亳州当地多个乡镇的10批亳白芍鲜品分别进行传统方法加工为白芍药材和传统片、产地加工与炮制一体化加工加工为趁鲜片及生斜片,再分别对亳白芍药材、不同加工方式饮片指纹图谱相似度、七种成分含量进行测定和比较,并基于中药饮片大多以汤剂形式应用于临床,进一步对传统片、趁鲜片和生斜片标准煎液指纹图谱和七种成分含量进行测定及指纹图谱比较,并对30批白芍饮片共有峰进行聚类分析。结果:1所建立的亳白芍及其标准煎液指纹图谱和多成分含量测定方法,方法学考察结果良好。2不同亳白芍种质质量差异较大,与传统亳白芍相比较,种子繁殖的杂花白芍相似度具显著性差异;杂花白芍中氧化芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷及白芍总苷(四种单萜苷总和)与传统白芍比较,P<0.01,具非常显著性差异;对不同种质白芍中七种成分含量进行聚类分析将传统亳白芍聚为一类,杂花白芍聚为一类。3亳白芍栽培品线条、蒲棒、鸡爪和麻扎等特征不同、不同栽培品中主要成分不同,较为常见的线条和蒲棒亲缘关系也不同,不同栽培品种生长年限亦不同,且产地存在多个栽培品混种的现象,使亳白芍质量下降。4通过调研制定了亳白芍规范化种植操作规程。5不同厚度亳白芍饮片碎屑率、下料率、翘片率以及不同厚度白芍饮片的干膏率、没食子酸等六种成分煎出率情况为,随着饮片厚度增加,碎屑率、下料率及翘片率逐渐增加,主要成分煎出率也略降低,但饮片厚度由1.5 mm至2.2 mm,六种成分煎出率变化均不显著(P>0.05),而当饮片厚度由3 mm至3.5 mm,芍药苷煎出率显著降低(P<0.05)。6亳白芍产地加工与炮制一体化研究发现,在亳白芍药材和不同加工方式饮片指纹图谱相似度差异为与生斜片组比较,传统片、趁鲜片及亳白芍药材P<0.05,传统片与白芍药材相似度比较,P<0.05,不同加工方式亳白芍标准煎液相似度情况为,与生斜片比较,趁鲜片和传统片P<0.05;亳白芍药材和不同加工方式饮片多种成分含量测定结果为,趁鲜片中氧化芍药苷、芍药苷含量明显高于传统片(P<0.05)、苯甲酸含量明显低于传统片(P<0.05);生斜片中氧化芍药苷、芍药苷含量明显高于传统片(P<0.05)、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖含量明显低于传统片(P<0.05);不同加工方式亳白芍饮片标准煎液研究中,趁鲜片标准煎液中没食子酸、芍药苷、苯甲酸含量均高于传统片,而生斜片中苯甲酸含量高于两煮制片,1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷含量含量低于两种煮制片。不同饮片中主要成分转移率情况为,传统片中氧化芍药苷、芍药苷、苯甲酸成分转移率与趁鲜片具显著性差异(P<0.05),且传统片中氧化芍药苷、芍药苷转移率7均高于趁鲜片,而被视为有害成分的苯甲酸转移率则为趁鲜片高于传统片,其余成分两种饮片间无显著性差异;白芍生斜片中四种单萜苷、五没食子酰葡萄糖及苯甲酸成分转移率均明显小于传统片(P<0.05)。结论:1建立的亳白芍及其标准煎液指纹图谱和多成分含量测定方法稳定可靠,可更加全面评价亳白芍质量。2以种子繁殖的杂花白芍指纹图谱与传统白芍相似度低,多种成分含量差异较大,而种质质量差异大,不应与传统白芍一并流入市场,应用于临床。3亳白芍栽培品种混杂种植,不同种质生长年限不同,影响亳白芍质量及产量,应大力对亳白芍种质进行纯化。4不同片厚亳白芍饮片损耗率和主要成分煎出率研究结果表明,传统白芍切制为1~2 mm的薄片时损耗率较高,2~3 mm厚饮片既能明显降低损耗,又不致有效物质煎出率明显受影响。建议白芍饮片切制厚度可宽限至3 mm以下,即不超过3mm即可。5亳白芍产地加工与炮制一体化工艺加工出的白芍趁鲜片较传统片总体质量无明显差异,其可省时省力,实现白芍无硫化加工,可与传统白芍片一并生产、应用。
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