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急性放射病（acute radiation syndrome,ARS）是指机体在短时间内一次或几次受到大剂量（>1Gy）电离辐射引起的全身性疾病,根据受照射剂量的不同,一般分为骨髓型（>1Gy）、肠型（>10Gy）和脑型（>100Gy）放射病。大于8Gy射线照射后的重度骨髓型放射病及肠型和脑型放射病尚难以救治存活,因此,重度骨髓型放射病的治疗是亟待解决的问题。目前临床上常使用抗放药来预防ARS,但抗放药需在照射前给药有效,不能作为辐射损伤救治药物,ARS的治疗药物主要为促进造血及提高免疫力,作用靶点较为单一。放射导致机体多种细胞严重损伤,细胞损伤后可产生热休克蛋白、氧自由基、兴奋性氨基酸、胞外基质降解产物等“内源性危险信号”,上述危险信号可启动炎症反应,导致肠、肺、脑、肝等多脏器发生非感染性炎症,通过抑制此种非感染性炎症可望减轻ARS。RH005是一类自主研发的重组蛋白类药物,前期已基本完成其药学、一般药理学、毒理学和药代动力学研究,表明其安全性高。初步药效学研究表明RH005具有抗炎、抗凋亡作用,能够减弱巨噬细胞分泌TNF-α,提示其可能抑制急性放射性非感染性炎症进而对ARS具有治疗作用。本研究首先进行药效评价并确定最佳给药方案。（1）量效关系及最佳给药剂量研究:采用C57BL/6N小鼠236只,随机分为对照组（Con组）、模型组（IR组）、地塞米松组（DEX组,4.5mg/kg）、氨磷汀组（W组,200mg/kg）、RH005低剂量组（L组,1μg/kg）、RH005中剂量组（M组,5μg/kg）及RH005高剂量组（H组,25μg/kg）。存活率实验每组20只,生理及取材Con组6只,其余各组每组15只。W组在照前半小时给药,其余给药组在接受8Gy 60Coγ射线照射后24h腹腔注射给药,Con和IR组腹腔注射给予生理盐水。通过小鼠30d存活率和平均存活时间及照射后8d对小鼠进行肺功能评价、脑电分析、放射免疫方法检测脑、肺脏及小肠炎性细胞因子、血常规及脑、肺和小肠组织病理学改变光学显微镜观察,探讨不同剂量的RH005对急性放射性炎症的治疗作用并确定最佳给药剂量。（2）最适给药次数研究:将实验用C57BL/6N小鼠236只,随机对照组（Con组）、模型组（IR组）、地塞米松组（DEX组,4.5mg/kg）、RH005给药1d组（M（1d）组,5μg/kg）、RH005给药3d组（M（3d）组,5μg/kg）、RH005给药7d组（M（7d）组,5μg/kg）和RH005给药14d组（M（14d）组,5μg/kg）。存活率实验每组20只,取材每组15只。各给药组在接受8Gy 60Coγ射线照射后24h腹腔注射给药,Con和IR组腹腔注射给予生理盐水。通过照射后40d内观察记录存活率;照射后8d取材,比较各组小鼠存活率及放射免疫方法检测脑、肺脏及小肠炎性细胞因子两个关键指标确定最佳给药次数。（3）时效关系研究:将C57BL/6N小鼠120只,随机分为4组:对照组（Con组）、模型组（IR组）、地塞米松组（DEX组,4.5mg/kg）和RH005组（T组,5μg/kg）,每组30只。于照射后2d、4d、8d及11d通过肺功能评价、脑部MRI分析及放射免疫方法检测脑、肺脏及小肠炎性细胞因子,探讨RH005对急性放射性炎症的治疗作用的时效关系。通过以上三方面研究最终确定RH005最佳给药方案。（4）在确定最佳给药方案后进行RH005对于急性放射性炎症的治疗作用机制研究:雄性SPF级C57BL/6N小鼠30只,随机分为3组:对照组（Con组）、模型组（IR组）和RH005组（T组,5μg/kg）,每组10只。于照射后11d取全脑、肺脏及小肠,后采用小鼠炎性体（Inflammasome）PCR芯片,检测RH005作用前后炎性体相关基因表达差异,探讨RH005作用机制。通过以上实验得出结果如下:（1）量效关系及最佳给药剂量研究结果:RH005可提高照后小鼠存活率、延长平均存活时间:照射后,IR组小鼠30d存活率为0%。RH005给药后,M组30d存活率为10%。IR组小鼠平均存活时间为（8.50±2.94）d、M组为（14.40±2.20）d。与IR组比较,RH005可显著提高照后小鼠存活率,推迟死亡出现时间,延长存活时间（P<0.01）;RH005可改善照后小鼠肺功能:照后IR组小鼠潮气量、每分钟通气量、吸气峰值及呼气峰值显著降低,RH005显著升高照后小鼠潮气量、每分通气量及吸气峰值（P<0.05）,以M组效果最佳;RH005可改善照射后小鼠脑电异常;RH005显著降低照后炎性细胞因子TNF-α、TGF-β等表达,以M组效果最佳;血常规结果显示,RH005对于照后小鼠外周血象无影响,说明其并非作用于造血系统;RH005显著减轻照后小鼠病理改变,给药后脑、肺和小肠病变显著减轻,脑组织神经元细胞核固缩、肺泡腔渗出、小肠细胞坏死及绒毛断裂均显著减轻,以M组效果最佳。（2）最适给药次数研究结果:RH005给药3d可显著提高照后小鼠存活率（P<0.01）、延长平均存活时间:IR组照后40d存活率为0%;M（3d）组40d存活率为50%;IR组平均存活时间为（9.80±2.94）d、M（3d）组为（27.30±8.03）d。细胞因子检测结果说明,RH005显著降低照后炎性细胞因子TNF-α、TGF-β等表达（P<0.05）,以M（3d）组效果最佳。（3）时效关系研究结果:RH005给药改善照后小鼠肺功能,给药后3d每分通气量、吸气峰值及呼气峰值呈升高趋势,给药后7d、10d上述指标显著升高（P<0.05）;MRI分析结果表明,RH005给药可减轻照后小鼠脑区坏死:IR组小鼠海马、皮层、纹状体及绣球等脑区出现低密度影于照后11d出现,提示脑区坏死,T组小鼠脑区未出现低密度影;细胞因子检测结果说明,RH005显著降低照后炎性细胞因子TNF-α、TGF-β等表达（P<0.05）,给药后3d显效,以给药后7d及10d降低最为显著。（4）RH005对于急性放射性炎症的治疗作用机制研究结果:通过小鼠炎性体PCR芯片筛选得出,照射后IR组小鼠脑组织较Con组小鼠差异基因共有11个,上调基因为:Ifng、Il-6、Mefv、Naip1、Nlrp4b、Nlrp4e、Nlrp5、Nlrp9b、Tnfsf11及Tnfsf4;下调基因为:Ciita。RH005给药后,T组较IR组检测有20个差异基因,全部为下调基因:Cd40lg、Ifnb1、Ifng、Il-12b、Il-1b、Il-6、Irf4、Krt14、Mefv、Naip1、Naip5、Nlrp12、Nlrp4b、Nlrp4e、Nlrp5、Nlrp9b、Tnf、Tnfsf11、Tnfsf14及Tnfsf4。肺组织:照射后IR组较Con组小鼠肺组织中差异基因共9个,上调基因为:Ccl12、Cflar、Chuk、Mapk8、Mok、Nod2、Notch1;下调基因为:Ccl5及Tnfsf14。RH005给药后,T组较IR组检测有4个差异基因,全部为上调基因:Il-6、Nlrp12、Nlrp9b及Tnf。小肠组:照后IR组较Con组小鼠小肠组织中差异基因共13个,上调基因为:Ccl12、Ccl7、Il-18;下调基因为:Bcl2l1、Birc3、Ccl15、Chuk、Irf4、Mapk3、Mapk8、Nlrc4、P2rx7及Xiap。RH005给药后,T组较IR组检测到Ciita为差异下调基因。通过以上实验结果,可得出以下结论:8Gy 60Coγ射线可致小鼠急性重度放射损伤,RH005对小鼠急性重度骨髓型放射病具有治疗作用。最佳给药方案为照射后24h腹腔注射给药,1次/d,药物剂量为5μg/kg,给药3d效果最佳。RH005治疗小鼠急性重度放射损伤的作用机制可能涉及RH005显著降低血液和组织中升高的TNF-α、TGF-β和IL-6水平,以及显著升高血液和组织中降低的IFN-γ水平。