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[目的]利用高通量lncRNA芯片筛选结直肠癌患者血清中差异表达的lncRNA,qRT-PCR检测其在结直肠癌细胞中的表达,并进行初步的功能研究,从而发现新的灵敏度及特异度高的结直肠癌潜在诊断标记物,为深入认识结直肠癌发生发展机制及诊治等提供新的实验基础。[方法]利用lncRNA芯片技术检测6名结直肠癌患者和4名健康志愿者血清中lncRNA的表达情况,对差异表达基因构建共表达网络,确定在结直肠癌患者血清中表达异常的候选lncRNA;进一步应用qRT-PCR检测候选lncRNA在36名结直肠癌患者和30名健康志愿者血清中的表达水平,评价其表达与临床病理特征的相关性及作为诊断标志物的特异度、灵敏度;应用慢病毒介导的siRNA技术干扰候选lncRNA在结直肠癌细胞中的表达水平,并筛选出表达差异较大的细胞及干扰效率较高的siRNA,通过CCK-8实验、划痕实验、细胞周期实验、细胞凋亡实验及Matrigel侵袭实验等体外实验,研究候选lncRNA对结直肠癌细胞生物学功能的影响。[结果]经lncRNA芯片分析,筛选得到差异表达的lncRNA 1540条、mRNA 556条(FC≥2且P<0.05),其中412条lncRNA在结直肠癌患者血清中表达上调,1128条表达下调。构建lncRNA-mRNA共表达网络发现在结直肠癌血清中高表达的long non-coding RNAFOXD3 antisense RNA1(lncRNAFOXD3-AS1)可能影响结直肠癌细胞生物学功能,作为后续实验的lncRNA。经qRT-PCR检测,lncRNA FOXD3-AS1在结直肠癌血清及HCT116、SW480、SW620、LoVo细胞中表达均上调(P<0.05),血清中的表达水平与淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.001),与患者的性别、年龄、肿瘤大小及浸润深度无关(P>0.05),AUC为0.91(95%CI=0.83-0.99,P<0.001),特异度为 96.67%,灵敏度为 86.11%。体外实验显示,干扰lncRNAFOXD3-AS1的表达后,结直肠癌细胞的增殖能力显著下降、凋亡比例显著增加,同时细胞的运动和侵袭能力得到显著抑制,细胞生长阻滞在DNA合成前期。[结论]主要研究结论如下:1 通过lncRNA芯片检测,发现了大量在结直肠癌血清中差异表达的lncRNA,这些lncRNA可能与结直肠癌的发生、发展、诊断、治疗及预后等有关,为进一步研究提供了实验基础。2 LncRNAFOXD3-AS1在结直肠癌患者血清中表达上调,可以较好的区分结直肠癌和健康志愿者,可能成为结直肠癌潜在的循环分子诊断标志物,对结直肠癌的诊断可能具有一定的临床意义。3 LncRNAFOXD3-AS1可通过调控结直肠癌细胞的生长周期、凋亡,进而调节细胞增殖,且在结直肠癌细胞运动及侵袭方面发挥着重要调节作用。