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背景:哮喘是一种以气道高反应性,嗜酸性粒细胞气道炎症以及可逆性支气管受限为主要特征的慢性气道炎症性疾病。哮喘患者体内存在凝血系统激活,部分凝血蛋白如凝血酶,凝血因子X以及纤维蛋白与哮喘活动密切相关。然而,这种关系的细胞机制尚不清楚。内皮细胞在凝血级联反应中起到重要作用,且内皮细胞靶向抑制组织因子(TF)和凝血酶在败血症和急性肺损伤等炎症模型中产生了抗炎抗凝的双重效果。目的:探讨内皮细胞靶向抑制TF和凝血酶在卵白蛋白(OVA)诱导的哮喘气道炎症模型中的作用和机制。方法:(1)采用OVA致敏和激发的方法构建小鼠哮喘气道炎症模型,在模型中引入CD31-TFPI-Tg和CD31-Hir-Tg两种内皮细胞靶向抑制TF或凝血酶的转基因小鼠,支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞学分析与HE染色观察气道炎症浸润,流式检测外周血嗜酸性粒细胞比例,PAS染色观察粘液分泌情况,肺组织Q-PCR检测Th2型炎症因子mRNA水平表达,ELISA检测相关炎症因子蛋白水平的表达。(2)构建骨髓移植模型,先将C57BL/6小鼠的骨髓移植到CD31-Hir-Tg小鼠体内,观察内皮细胞靶向抑制凝血酶对哮喘气道炎症的作用。然后将CD31-Hir-Tg小鼠骨髓移植到C57BL/6小鼠体内,观察单核细胞和血小板对哮喘气道炎症的作用。(3)将C57BL/6小鼠随机分为生理盐水组和OVA模型组,检测血常规及凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT),血浆纤维蛋白原(FIB)等凝血指标,ELISA检测血浆中凝血酶蛋白表达,行免疫组化和流式分析,检测OVA模型中肺内皮细胞表面TF和蛋白酶激活受体1(PAR1)表达水平。结果:(1)CD31-TFPI-Tg哮喘模型组BALF炎症细胞数目,及嗜酸性粒细胞的比例和绝对值较C57BL/6哮喘模型组无显著性改变。(2)CD31-Hir-Tg哮喘模型组与C57BL/6哮喘模型组相比,BALF嗜酸性粒细胞的比例和绝对值下降,外周血嗜酸性粒细胞比例下降,气道炎症浸润减少,粘液分泌减少,肺组织炎症因子mRNA水平和蛋白水平的表达均下降。(3)接受C57BL/6小鼠骨髓的CD31-Hir-Tg哮喘模型组与接受C57BL/6小鼠骨髓的C57BL/6哮喘模型组相比,BALF嗜酸性粒细胞的比例和绝对值下降,气道炎症浸润减少,粘液分泌减少,肺组织炎症因子mRNA和蛋白水平表达均下降。(4)接受CD31-Hir-Tg小鼠骨髓的C57BL/6哮喘模型组与接受C57BL/6小鼠骨髓的C57BL/6哮喘模型组相比,BALF炎症细胞数目,及嗜酸性粒细胞的比例和绝对值无显著性改变。(5)C57BL/6模型组与生理盐水组相比,外周血嗜酸性粒细胞比例及血小板数目显著性增加,中性粒细胞比例,凝血酶蛋白水平,APTT、PT、TT和FIB等凝血指标均无显著性改变,肺内皮细胞表面TF-PAR1表达水平无显著性改变。结论:在OVA诱导的哮喘气道炎症模型中,凝血功能无显著性改变。肺内皮细胞表面TF表达无显著性改变,内皮靶向抑制TF无法缓解气道炎症。内皮细胞靶向抑制凝血酶可缓解OVA诱导的哮喘模型中的气道炎症,但肺内皮细胞表面PAR1表达无显著性改变,凝血酶在哮喘气道炎症中的作用机制有待进一步探索。