胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma,PD AC）是一种患者预后极差的消化系统肿瘤,是胰腺恶性肿瘤最常见的病理类型,其治疗难度很大。诸多研究表明myeloma overexrepssed（MYEOV）是一种促癌基因,在多种人类肿瘤的发生发展中起着重要的作用。然而MYEOV在胰腺导管腺癌中的作用尚不清楚。本研究旨在阐明MYEOV在胰腺导管腺癌中的作用及其机制。本课题由四个部分组成,具体内容如下:第一章:MYEOV在胰腺导管腺癌中的表达水平及其临床转化意义目的:检测MYEOV在胰腺导管腺癌中的表达情况,分析其在判断肿瘤分期分级、评价预后方面的临床转化意义。方法:运用免疫组化检测胰腺导管腺癌组织芯片（含有71对癌/癌旁组织）标本中的MYEOV蛋白表达水平,并进一步分析它和患者各项临床指标及预后的相关性。通过蛋白质印迹法对胰腺癌细胞系及正常胰腺导管上皮细胞系中的MYEOV蛋白表达情况进行检测。运用临床数据库（包括TCGA及GEO）分析胰腺导管腺癌及非癌胰腺组织的MYEOV mRNA的表达量,并进一步分析它与各项临床指标及患者预后的相关性。结果:MYEOV在胰腺导管腺癌中表达量升高,其高表达与肿瘤的T分期相关。高表达MYEOV的患者预后更差,MYEOV是胰腺癌患者预后的独立预测因子。第二章:MYEOV在胰腺导管腺癌中的调控机制目的:探索MYEOV在胰腺导管腺癌中高表达的机制。方法:运用公共数据库（包括MethHC及cBioPortal）分析胰腺导管腺癌与非癌组织中MYEOV启动子甲基化的水平及其与MYEOV mRNA表达量之间的相关性。焦磷酸测序检测正常胰腺导管上皮细胞系及胰腺癌细胞系中MYEOV启动子甲基化的水平。对低表达MYEOV的细胞系进行去甲基化处理,运用qPCR检测其MYEOV mRNA表达量的变化。结果:MYEOV启动子甲基化水平在胰腺导管腺癌中有所降低。MYEOV启动子甲基化水平与其mRNA表达量呈负相关关系。低表达MYEOV的细胞系经过去甲基化处理后其MYEOV mRNA表达量有所上调。第三章:MYEOV对胰腺导管腺癌生物学功能的影响目的:探讨MYEOV在胰腺导管腺癌转移及增殖方面扮演的角色。方法:构建MYEOV稳定过表达/敲降细胞株,实施了 Matrigel侵袭实验、迁移小室实验、细胞划痕愈合实验、集落形成实验、CCK-8实验,构建裸鼠肝转移模型、裸鼠皮下成瘤,探究MYEOV在胰腺导管腺癌转移及增殖中的作用。结果:敲降MYEOV能在体内及体外抑制胰腺导管腺癌的转移及增殖,过表达MYEOV则能促进肿瘤的转移及增殖。第四章:MYEOV在胰腺导管腺癌中的促癌分子机制目的:进一步阐明MYEOV发挥促癌功能的具体分子机制。方法:利用免疫沉淀、蛋白质谱、Co-IP、免疫荧光共定位等实验筛选MYEOV在胰腺中的互作蛋白。运用qPCR、荧光素酶实验、ChIP探究MYEOV对HES1转录的影响。在过表达MYEOV的胰腺癌细胞及对照组细胞中,对HES1、SOX9进行敲降,做肿瘤生物学功能的回复实验。结果:免疫沉淀及蛋白质谱的结果显示SOX9可能是MYEOV的互作蛋白,Co-IP及免疫荧光共定位进一步证实了该发现。qPCR、荧光素酶实验、ChIP的结果显示MYEOV能够促进SOX9的DNA结合能力,从而增强其下游基因HES1的转录及表达。肿瘤生物学功能回复实验表明,敲降HES1、SOX9能够抑制MYEOV的促癌功能。通过上述研究,我们得到如下结论:在胰腺导管腺癌中MYEOV基因的启动子低甲基化导致了其异常高表达。MYEOV是胰腺导管腺癌患者预后的独立预测因子。MYEOV能够与SOX9互作,并增强其DNA结合能力,促进下游基因HES1的转录,从而发挥促癌作用。MYEOV是胰腺导管腺癌的潜在治疗靶点。