【摘 要】
：
目的血管平滑肌细胞（Vascular Smooth Muscle Cells,VSMCs）是血管壁的主要组成成分,它们的异常增殖和迁移是血管损伤后再狭窄、移植物动脉硬化、动脉粥样硬化等血管增殖性疾病的重要细胞学基础。转化生长因子β激活激酶1（TAK1）是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,可以被生长因子和细胞因子等激活,参与调控细胞分化、增殖和迁移等多种生物学功能。本研究旨在探讨TAK1在血小板衍生生长因子B
【基金项目】
：
国家自然科学基金（No.81670374;No.81370582）；
论文部分内容阅读
目的血管平滑肌细胞（Vascular Smooth Muscle Cells,VSMCs）是血管壁的主要组成成分,它们的异常增殖和迁移是血管损伤后再狭窄、移植物动脉硬化、动脉粥样硬化等血管增殖性疾病的重要细胞学基础。转化生长因子β激活激酶1（TAK1）是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,可以被生长因子和细胞因子等激活,参与调控细胞分化、增殖和迁移等多种生物学功能。本研究旨在探讨TAK1在血小板衍生生长因子BB（PDGF-BB）诱导血管平滑肌细胞增殖和迁移中的作用及其分子机制。方法1.采用组织贴壁法体外分离培养原代大鼠血管平滑肌细胞,予以重组PDGF-BB进行诱导处理。利用Western Blot分析检测TAK1的蛋白表达及磷酸化水平,用实时定量RT-PCR（q RT-PCR）检测TAK1的m RNA水平。2.用小干扰RNA（si RNA）敲低TAK1基因表达,或用TAK1抑制剂5Z-7-Oxozeaenol预处理血管平滑肌细胞,随后用PDGF-BB诱导处理。（1）用CCK-8实验检测细胞活性,用Ed U增殖分析检测细胞DNA合成情况,用Western Blot分析检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达水平,用Transwell和划痕实验检测细胞的迁移能力。（2）用流式细胞术检测细胞周期分布,用Western Blot分析检测周期相关蛋白Cyclin D1、Cyclin E1、CDK2和CDK4的表达水平,并检测自噬相关蛋白Beclin 1、LC3B及p62的蛋白水平,用免疫荧光染色检测LC3B蛋白的表达水平及细胞内分布情况。3.用自噬抑制剂3-Methyladenine（3-MA）或Spautin-1分别预处理血管平滑肌细胞,经PGDF-BB诱导处理后,用CCK-8实验检测细胞活性,用划痕实验检测细胞迁移能力,用Western Blot分析检测前述周期相关蛋白以及PCNA的蛋白表达水平。4.用5Z-7-Oxozeaenol和/或Spautin-1预处理血管平滑肌细胞,经PGDF-BB诱导处理后,用Western Blot分析检测PCNA及自噬相关蛋白的表达水平。结果在血管平滑肌细胞,PDGF-BB可以上调TAK1的m RNA及蛋白表达,诱导TAK1的磷酸化激活,并能显著促进细胞增殖和迁移。用TAK1-si RNA敲低TAK1基因表达,或用5Z-7-Oxozeaenol抑制TAK1活性,均能有效抑制PDGF-BB诱导的细胞DNA合成及PCNA表达增加,并伴随有细胞增殖和迁移能力明显减弱。进一步分析显示,PDGF-BB通过活化TAK1上调细胞周期相关蛋白Cyclin D1、Cyclin E1、CDK2和CDK4的蛋白表达,诱导血管平滑肌细胞周期从G1期进入S期。此外,TAK1介导PDGF-BB激活细胞自噬,表现为细胞自噬相关蛋白Beclin1和LC3B的蛋白水平上调,而p62的蛋白含量降低。用3-MA或Spautin-1预处理血管平滑肌细胞抑制细胞自噬后,能有效阻断PDGF-BB诱导的细胞周期相关蛋白及PCNA蛋白表达上调,显著抑制细胞增殖和迁移。并且,在PDGF-BB处理的血管平滑肌细胞中,TAK1抑制剂5Z-7-Oxozeaenol和自噬抑制剂Spautin-1都能引起程度相当的细胞增殖抑制效应,但Spautin-1并不能进一步增强5Z-7-Oxozeaenol的细胞增殖抑制效应,结果提示PDGF-BB通过活化TAK1/细胞自噬信号通路促进血管平滑肌细胞增殖和迁移。结论PDGF-BB通过上调TAK1的蛋白表达和活化诱导血管平滑肌细胞自噬,从而促进细胞增殖和迁移。研究结果表明,TAK1可能是血管增殖性疾病的有效治疗靶点。
其他文献
初中生正处于培养和形成良好思维能力的关键时期，而对于初中英语教学来说，通过阅读教学帮助初中生培养和形成良好的思维能力就成为十分有效的手段。英语阅读教学与学生思维能力的培养是相互促进的，初中英语教师通过阅读教学既可以培养学生的思维能力和英语思维，又可以促使学生在英语学习中灵活运用思维模式和方法，提高初中生的英语综合素养与考试成绩，这就需要初中英语教师探究英语阅读教学手段与方法，以促进学生思维能力的培
随着计算机视觉等相关技术的快速发展,自动驾驶汽车得以面世并快速迭代更新。对周围环境的准确感知是自动驾驶技术中极为基础和重要的一环,而图像语义分割技术可将汽车获取到的道路场景图像分割成表示不同类别的区域,可为自动驾驶汽车感知周围环境和做出决策提供重要的依据,已成为自动驾驶任务中不可或缺的技术。由于道路场景图像存在目标种类繁多、尺度变化较大等特点,道路场景语义分割成为一个具有挑战性的问题。传统的图像分
随着大数据时代的到来,数据中心已经成为重要的基础设施。网络安全威胁层出不穷,数据中心的安全成为大家关注的焦点。针对数据中心开展实时安全监测分析是确保网络安全的重要手段之一。然而,数据中心的东西向流量达到100G,甚至200G,对实时网络流数据分析技术提出了更高的要求。对此业界引入网络遥测技术进行网络状态监测。网络遥测数据中包含全面且实时的网络信息,为大规模网络实时异常监测、网络威胁在线检测等奠定了
群体智能优化算法的涌现为解决各类问题提供了新的工具,但优化算法存在易陷入局部最优、收敛精度低等不足。本文研究了3种群体智能优化算法:灰狼优化算法（grey wolf optimizer,GWO）、蝴蝶优化算法（butterfly optimization algorithm,BOA）及粒子群优化算法（particle swarm optimization,PSO）。针对群体智能优化算法的不足,本文
远程控制木马是一类以窃取机密信息为主要目的的恶意程序,常被用于高级可持续威胁（Advanced Persistent Threat,APT）攻击的后渗透阶段,严重威胁着网络空间安全,对远程控制木马的检测方法研究具有重要的实际意义。现阶段基于网络的远程控制木马检测方法大多对数据流的完整性有较高的要求,其检测存在一定的滞后,而相应的早期检测方法中漏报率与误报率有待进一步降低,同时,少有研究者考虑远程控
白粉病是严重影响小麦生产的重要病害之一。挖掘抗病基因和培育抗病品种是控制这种病害最直接有效的方法。本单位选育的小麦品种贵紫麦1号,自2015年育成以来,在生产上一直对白粉病表现中抗且抗性稳定。本研究用贵紫麦1号与中燕特大粒、贵麦13等亲本构建F2、F2:3抗感分离群体,对贵紫麦1号白粉病抗性进行了遗传分析,并利用SSR分子标记对其抗白粉病基因进行了定位和分析。同时,利用贵紫麦1号相关遗传群体对标记
花青素是蓝莓果实中主要保健成分,有很强的抗氧化和清除自由基能力,除了品种差异外,其成分组成及含量也受光照等环境因素的影响,但目前对蓝莓果实和叶片花青素含量的动态变化,以及相关的生理指标与光照之间的关联性并不清楚。因此,本研究以南高丛蓝莓“奥尼尔”为研究对象,使用光度计,设置4个处理,分别为全光照（CK）、75%光照强度、50%光照强度和25%光照强度,研究光照强度对蓝莓果实与叶片在果实白果期、紫果
木质素是仅次于纤维素的第二大类天然聚合物,是很好的石油基原料的替代品,对其实现高值化利用有利于聚合物的可持续发展。木质素运用主要可分为两个路径,一是不破坏木质素骨架的基础上直接利用,二是木质素可通过“生物炼制”得到许多木质素衍生的小分子,这些小分子可以通过重新组装,形成新的聚合物。无论是木质素,还是木质素衍生的小分子,酚羟基普遍存在于结构当中,因此基于酚羟基的改性对木质素及木质素衍生的酚类化合物更
硅片封装表面变形测量对于保证集成电路产品的性能与可靠性、封装工艺分析与优化,具有重要意义。本文围绕硅片封装表面变形动态高精度的测量需求,基于液晶相位调制干涉测量技术,研究设计硅片封装表面变形测量系统,主要内容如下:（1）提出了基于液晶延迟器的相位调制干涉表面测量方法,实现硅片封装表面变形的动态测量,并且通过琼斯矩阵分析了其原理。由于采用液晶相位调制实现远高于硅片表面变形速度的毫秒级快速相移操作,保
马尾松（Pinusmassoniana）是我国重要用材树种和造林先锋树种,具有速生、丰产、耐寒耐贫瘠、适应性强、综合利用程度高等优良特性。修枝是一种重要的营林方式,通过科学去除林木下层枝条,减少林木节疤数量,提高林木养分利用率,增强林下太阳辐射通量,促进林下植物生长,调节土壤环境,稳定林分生态系统,促使林木优质生长,提高木材质量和收益。为了解修枝对马尾松生长及其林内环境的影响机制,本研究选择了7年