灵芝是我国传统的药食真菌,硒则是人体的必须微量元素,两者对许多疾病都有防治作用,近年来对灵芝和硒活性的研究较为深入,但将灵芝菌丝体和硒有机结合成为富硒灵芝,国外未有报道,而国内也鲜有报道。灵芝硒多糖是通过生物转化作用得到的人为的富硒真菌多糖,其中硒从无机态被转变成为有机态。从营养学和生化代谢角度考虑,灵芝硒多糖这种生物源有机硒具有吸收利用率高、生理药理功能优越,安全、五无毒副作用等特点而优越于无机硒。因此,富硒灵芝的研究具有重要的现实意义。本论文的研究结果如下:通过比较灵芝菌株在液体富硒、固液体混合富硒和固体富硒培养模式下的富硒能力和有机硒转化效率,并分析固体富硒培养模式下硒对灵芝多糖产量和结构的影响发现:当液体培养基中硒浓度为500μg/mL时,菌丝有机硒含量最高,达到6329.21μg/g;固态培养基中硒浓度为700μg/g时,菌丝有机硒转化率最高,达到18.58%;在固态培养基中添加硒的浓度在200μg/mL以下时,可提高菌丝体多糖含量;红外光谱分析显示,硒的富集没有改变灵芝多糖的主体结构,硒多糖中的硒可能以硒酸酯的形式存在(Se-OH)。通过比较体外灵芝硒多糖和多糖对羟自由基的清除率和还原力,发现灵芝硒多糖对羟自由基的清除率和还原能力明显优于普通的灵芝多糖,10 mg/mL的硒多糖对羟自由基的清除率可达95%,相同浓度下硒多糖的还原力也较多糖高。这说明灵芝硒多糖在体外抗氧化的功能上更具有优势。将60只昆明雄性小鼠随机等数分成5组,即对照组、灵芝多糖中剂量组(100mg/kg·d)、灵芝硒多糖高剂量组(200 mg/kg·d)、灵芝硒多糖中剂量组(100mg/kg·d)、灵芝硒多糖低剂量组(50 mg/kg·d),每组12只。对各受试动物组经口灌胃,分别给于各组受试物,对照组给于生理盐水。各组小鼠灌胃30天后,测定各组小鼠肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力和丙二醛(MDA)含量。结果显示灵芝硒多糖可明显提高小鼠肝组织SOD酶活力,可极显著提高GSH-PX活力以及在一定程度上减少组织MDA含量。结果表明灵芝硒多糖具有抗氧化功能。实验还进一步改进了多糖的测定方法。以水浸提灵芝多糖的过程中,利用α-淀粉酶特异性地去除了菌丝中夹带的培养基淀粉,并研究了淀粉酶降解淀粉的工艺。通过对加酶量、酶解时间、酶解温度的单因素试验和三因素三水平正交试验,得到了淀粉酶降解淀粉杂质的最佳工艺条件为:在灵芝菌丝浸提液中最适加酶量为0.46μ/ML,最佳酶解时间为20min,最佳酶解温度为50℃。对苯酚硫酸法测定多糖显色方式进行了研究,通过对水浴温度、水浴时间、冷却时间设计三因素三水平的正交试验,确定了优选的显色方式为:取待测溶液2.0mL,加入5%的苯酚溶液1 mL,混匀后迅速滴加浓硫酸5 mL,摇匀20℃放置30 min后,在490 nm波长处测定。