洋底裂褶菌20R-7-F01菌株交配(亚)型的遗传和生物学特性研究

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裂褶菌(Schizophyllum commune Fr.)是通过异宗配合进行有性生殖的担子菌,属于担子菌亚门(Basidiomycotina)、伞菌目(Agaricales)、裂褶菌科(Schizophylllaceae)、裂褶菌属(Schizophyllum)的一个种,是地球上分布最广的真菌之一,至少可以定殖于150属木本植物,拥有复杂的多糖分解机器和抗菌、杀虫及细胞与基因毒性活性,被广泛应用于环境治理、工业生产及医疗卫生等领域。还可以导致硬膜外脓肿、皮肤感染性肉芽肿、菌性鼻窦炎和变应性支气管肺真菌病等疾病。此外,裂褶菌也是一种模式蘑菇,已完成了基因组的测序,并用于真菌细胞壁的形成、菌丝融合和发育以及交配类型的研究。裂褶菌具有典型的双因子四极性交配系统,是研究真菌及其他生物遗传进化的理想菌种。为此,本论文利用前期从洋底约2km深、2000万年的含煤沉积物中分离获得一株裂褶菌20R-7-F01,研究了其交配(亚)型的遗传和生物学特性,从有性生殖遗传变异的角度,探究了该菌的系统进化规律,取得如下进展:1.采用担孢子收集法,获得3×10~7个裂褶菌20R-7-F01菌株担孢子;通过锁状联合的显微镜检查及子实体形成试验,排除了双核菌丝的存在,共制备了24个单核体;利用PDA培养实验,比较了24个单核体的菌落和菌丝形态差异,发现不同的单核体具有不同的生长表型,可归纳为:平贴型、绒毛型、基生型和松散型。2.利用对峙反应、子实体形成和交配型基因的PCR扩增实验,鉴定了裂褶菌20R-7-F01菌株20个单核体的交配型,共获得4种交配类型,分别为AxBx、AxBy、AyBx和AyBy,各占20%、40%、15%和25%。Fisher’s检验显示,不同交配型占比无显著性差异,表明该菌的交配型基因不存在偏分离现象。3.与现代裂褶菌H4-8菌株交配型基因的比对结果显示,洋底裂褶菌20R-7-F01菌株的单核体交配型基因数量相对较少,交配型位点A含HD2家族基因aay1和abr6;交配型位点B含bbr2、bar3、bbp2(1)和bbp2(2)基因以及类信息素和素类信息素受体编码基因各一个。这些基因在裂褶菌中高度保守,但氨基酸序列存在着较大差异。4.比较了不同培养基、碳源、氮源、重金属和pH对裂褶菌20R-7-F01菌株交配(亚)型生长速率的影响,发现20R-7-F01菌株的AyBx交配型具有极强的环境适应性。综上所述,裂褶菌20R-7-F01菌株具有简单的交配(亚)型基因组成,在维持其有性生殖能力的前提下,以减少不必要的物质与能量损耗,适应洋底极端环境。
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