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阿尔茨海默病(Alzheimersdisease，AD)是一种以严重的认知和记忆功能减退为临床表现的神经退行性病变。随着人口老龄化进程的加快，AD患病率显著增加，给社会及家庭带来了严重的危害，目前国内外尚无理想的治疗药物。聪明汤为一首经典古方，始载于《古今医鉴》卷八，由茯神、石菖蒲及远志三味中药组成，主治不善记而多忘者。 本团队前期药理采用AD转基因小鼠等模型进行药理活性筛选，发现该复方具有显著的抗AD药效作用。为揭示复方药效物质，阐明其作用机理，本文对复方及单味药材成分、动物口服复方及单味药后吸收进入体内的成分和代谢物以及部分单体成分的体内代谢等进行了较系统研究，取得以下主要成果: 1、复方组成药材的化学成分分离及鉴定 采用多种色谱分离技术对复方组成药材化学成分进行分离制备，并运用NMR等多种波谱手段对化合物结构进行了确证。从茯神中分离得到12个化合物，分别为poricoicacidAM，dehydrotrametenolicacid，eburicoicacid,dehydrotrametenonicacid,dehydroeburiconicacid,pachymicacid,poricoicacidAE,poricoicacidB,poricoicacidA,β-sitosterol,7-oxocallitrisicacid及ergosta-6,22-dien-3β，5，8α-triol，其中化合物7-oxocallitrisicacid及ergosta-6，22-dien-3β，5，8α-triol系首次从该植物中分离得到;从石菖蒲中分离鉴定了8个化合物，分别为emodin,physcion,asaronaldehyde,diasaroneⅠ,β-sitosterol,α-asarone,tatananC及tatanansA;从远志中分离得到22个化合物，分别为3，4，5-trimenthoxycinnamicacid,1,2,3,6,7-pentamethoxyxanthone,1,7-dimethoxy-2,3-methylenedioxyxanthone,6,8-dihydroxy-1,2,4-trimethoxyxanthone,1,7-dihydroxy-2,3-dimethoxyxanthone,1,7-dimethoxyxanthone,1,7-dihydroxyxanthone,aurantiamideacetate,5-hydroxymethylfurfural,3,6-disinapoylsucrose,3,4,5-trimethoxybenzaldehyde,tenuifolioseA,tenuifolioseH,tenuifolioseB,tenuifolioseⅠ,tenuifolioseJ,tenuifolisideA,sucrose18,sucrose3,sibiricoseA2，sucrose1和polygalaxanthoneⅢ，其中化合物aurantiamideacetate为首次从该植物中分离得到。 上述单体化合物的分离和鉴定，既为下一步的复方及动物体内成分分析提供结构明确的化学对照品，提高分析鉴定结果的可靠性，也可直接用于药理活性筛选，寻找抗AD活性成分。 2、茯神提取物成分分析及体内代谢研究 采用LC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术对茯神提取物及大鼠口服吸收入体内的成分进行分析鉴定。在对分离制备的8个茯神单体对照品进行质谱裂解途径进行分析归纳的基础上，根据高分辨精确分子量、碎片离子裂解规律和保留时间差异，结合文献数据，从茯神提取物中检测到30个三萜类化合物，从大鼠口服茯神提取物后含药血中检测到2个原形成分，含药尿中检测到8个原形成分。 3、石菖蒲提取物成分分析及体内代谢研究 采用LC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术对石菖蒲提取物及大鼠口服吸收入体内成分进行分析鉴定。根据高分辨精确分子量、碎片离子裂解途径和保留时间差异，结合文献数据，从石菖蒲提取物中分析检测到11个化合物，从大鼠含药血中检测到4个原形成分，含药尿中检测到5个原形成分。 4、远志提取物成分分析及体内代谢研究 采用LC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术对远志提取物及大鼠口服吸收入体内成分进行分析鉴定。根据高分辨精确分子量、碎片离子裂解途径和保留时间差异，结合文献数据，从远志提取物中检测到50个化合物，分别为3个口山酮、4个口山酮苷，6个蔗糖酯、19个寡糖酯及18个三萜皂苷类化合物;从大鼠口服远志提取物后含药血液中检测到10个原形成分及2个代谢物，含药尿中检测到27个原形成分及7个代谢产物。 5、复方提取物成分分析及体内代谢研究 采用LC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术对复方提取物及大鼠口服吸收入体内成分进行了分析鉴定，根据高分辨精确分子量、碎片离子裂解规律和保留时间差异，结合文献数据，从复方提取物中检测到48个化合物，其中10个来源于茯神，3个来源于石菖蒲及35个来源于远志;从大鼠口服复方提取物后含药血液中检测到6个原形成分和2个代谢物;从含药尿中检测到14个原形成分和2个代谢物。 通过比较单味、复方提取物成分与动物口服后的体内成分异同，发现无论单味药还是复方，虽然化学成分数量和结构类型很多，但可吸收进入体内的只是少数，这些进入体内的中药原形成分以及由此产生的代谢产物，其中一部分可能是在体内产生药效的物质，药理活性筛选将重点针对这些可吸收的成分。 6、α-细辛脑在大鼠体内代谢研究 采用LC-ESI-Q-TOF-MS/MS分析技术对复方主要药效成分之一α-细辛脑进行了体内代谢研究，从大鼠口服α-细辛脑后的含药血中检测到原形成分和4个代谢产物，含药尿中检测到原形成分和7个代谢产物，含药脑脊液中仅检测到原形成分。α-细辛脑在大鼠体内的可能代谢途径为:羟基化、去甲基化、葡萄糖醛酸化及硫酸化。上述研究结果表明，动物口服α-细辛脑后能迅速吸收入血液并透过血脑屏障进入脑中，提示α-细辛脑在复方中可能以原形形式进入脑中发挥药效。