目的:1型糖尿病（type 1 diabetes,T1D）目前尚无根治性治疗方法。目前临床上主要以胰岛素（insulin,INS）替代治疗为主,但是这种治疗方法不能使机体根据自身血糖变化调控胰岛素的释放,患者常面临血糖波动及低血糖风险。糖尿病治疗的根本目标是保留和恢复功能性β细胞,目前许多研究认为最有效且具有长效性的方法是行β细胞替代治疗。胰管和β细胞关系密切,过去的基因谱系追踪实验显示胚胎胰腺的导管干中含有内分泌细胞的多功能祖细胞,在胚胎期,前内分泌细胞从上皮层脱离后,新生的胰岛内分泌细胞从胰腺导管出芽,随后分离出来迁移到胰岛生态位形成胰岛。目前一些研究发现在成体胰腺组织切片中可观察到胰腺导管中存在芽出细胞,行免疫组化染色显示INS+,其可能是β细胞。因此,进一步明确成体胰腺导管上芽出细胞的性质及功能,探究其与β细胞的关系,对寻找β细胞的替代治疗的可能来源,治疗T1D有重要的意义。方法:1.腺腺导管芽出细胞性质研究通过对8-12周雌性C57BL/6背景的未怀孕（NP）小鼠与妊娠晚期第16天（G16）小鼠行INS及DBA（二氨基联苯胺）胰腺导管免疫组化染色实验,观察并验证胰腺导管芽出细胞的性质。并采用流式细胞术从NP和G16小鼠胰腺中分离出DBA+细胞,然后使用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-q PCR）技术定量对比分析G16小鼠和NP小鼠胰腺导管DBA+细胞的INS m RNA。2.腺腺导管芽出细胞功能研究。1)腺腺导管芽出细胞胰岛素分泌功能研究为谱系追踪胰腺导管芽出细胞的功能,使用INS1-Cre;Tomato小鼠,在INS1cre;Tomato雌性小鼠10周龄时,从胰腺导管内泵入CFDA-SE染剂标记胰腺导管细胞,3周切口愈合后,与雄性C57BL/6小鼠进行交配,怀孕小鼠为实验组,NP小鼠为对照组。取小鼠胰腺、分离小鼠胰岛制备单细胞悬液,通过流式细胞术筛选出4种细胞,分别为小鼠胚胎期16天（E16）胰腺中的tomato+细胞、NP小鼠胰岛中的tomato+细胞、G16小鼠胰岛中的tomato+细胞、G16小鼠CFDA-SE+的导管细胞中的的tomato+细胞。取其中G16小鼠胰岛的tomato+细胞和G16小鼠CFDA-SE+细胞中的tomato+细胞培养过夜后行葡萄糖刺激实验评估腺腺导管芽出细胞分泌胰岛素功能。使用RT-q PCR技术检测并分析上述筛选出的4种细胞与β细胞相关基因INS、Glut2和Maf A的m RNA表达水平。2)腺腺导管芽出细胞迁移功能研究使用INS-Cre,Tomato小鼠模型,按上述方式在小鼠10周龄时,胰腺导管内泵入CFDA-SE染剂标记胰腺导管细胞,3周切口愈合后,与雄性C57BL/6小鼠进行交配,怀孕小鼠为实验组,未怀孕（NP）小鼠为对照组。取胰腺组织行胰腺切片免疫组化染色定量分析进入胰岛内CFDA-SE+细胞。通过流式细胞术筛选4种细胞,分别为E16小鼠胰腺中的tomato+细胞、NP小鼠胰岛中的tomato+细胞、G16小鼠胰岛中的tomato+细胞、G16小鼠CFDA-SE+的导管细胞中的tomato+细胞,使用RT-q PCR测定并分析上述4类细胞与迁移相关的基因ZEB2、Snail2和MMP9的m RNA表达水平。通过GEO数据库挖掘和生物信息学分析,比较小鼠胚胎期和成年期、人胚胎期和成年期β细胞迁移相关基因的表达情况,进一步验证不同时期迁移基因表达差异与β细胞迁移能力的关系。结果:1.腺腺导管芽出细胞性质研究:胰腺导管芽出细胞免疫组化INS+,RT-q PCR检测表达INS基因。2.腺腺导管芽出细胞功能研究:1)胰腺导管芽出细胞的胰岛素分泌功能异常,葡萄糖刺激试验显示胰腺导管芽出细胞基础胰岛素及刺激后胰岛素分泌功能低下,RT-q PCR检测其表达与β细胞相关基因INS、Glut2和Maf A的m RNA水平相对低。2)胰腺导管芽出细胞免疫组化试验显示其不能迁徙进入原有的胰岛,表达迁移相关基因ZEB2、Snail2和MMP9的m RNA水平水平低,生物信息学分析也表明在正常糖代谢的小鼠和人群中,成年期β细胞比胚胎期β细胞迁移相关基因m RNA水平表达更低。结论:胰腺导管芽出细胞胰岛素染色阳性,表达胰岛素基因,但胰岛素分泌功能异常,且无迁徙能力,不能迁徙进入原有胰岛。在正常生理条件下,不是功能性β细胞的有效来源。