研究背景与目的:胃癌（gastric cancer,GC）是常见的肿瘤之一,是癌症死亡的第三个主要因素。胃癌患者的5年总体生存率比较低,目前治疗胃癌的方法主要有手术（外科手术或内镜下手术）、放疗及化疗,但其治疗效果有限。斑点型POZ蛋白（Speckletype POZ protein,SPOP）是一种E3泛素连接蛋白,SPOP突变位点主要位于MATH（Meprin and TRAF-C Homology）域,该域突变会影响底物的识别与结合。研究发现SPOP通过促进肿瘤细胞中蛋白的泛素化及降解,降低细胞的增殖活力、侵袭及迁移能力。恶性肿瘤的内部缺氧可导致低氧诱导因子的积累,并且可以调控多种基因的转录水平;低氧将中断HIF-1α的泛素化降解过程,导致HIF-1α大量聚积于细胞中,通过激活肿瘤相关靶基因改变细胞的生物学行为。有研究报道肿瘤缺氧时,HIF-1α可通过Hedgehog（Hh）、TGF-β、Wnt等信号通路诱导肿瘤细胞的侵袭及迁移,导致不良预后。我们前期研究发现免疫组化结果中SPOP在胃癌组织中的表达明显低于癌旁正常胃粘膜组织中的表达,且SPOP蛋白可抑制Hh/Gli2信号通路从而减弱胃癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力。因此,我们推测HIF-1α和SPOP存在相互作用,并对胃癌细胞的生物学行为产生影响。本研究将探讨SPOP/HIF-1α信号轴对胃癌细胞生物学行为的影响及作用机制,为胃癌的诊断、靶向治疗提供更新的思路和可靠的理论依据。材料与方法:1.免疫组织化学方法检测SPOP、HIF-1α蛋白在人胃癌及相应癌旁正常组织中的表达。2.Kaplan-Meier曲线分析SPOP、HIF-1α的表达与胃癌患者总生存期的关系。3.构建SPOP低表达胃癌细胞模型以及SPOP低表达和（或）HIF-1α低表达共培养细胞模型,采用MTT法、平板克隆形成法和Transwell实验法检测胃癌细胞的增殖活力、迁移及侵袭能力。4.免疫共沉淀（CO-IP）法检测人胃癌细胞系MKN45中SPOP与HIF-1α的相互作用。5.敲减MKN45细胞中SPOP的表达并采用Western blot方法检测下游相关基因蛋白的表达。结果:1.SPOP、HIF-1α蛋白在人胃癌及癌旁正常组织中的表达及与胃癌患者预后的关系（1）SPOP在人体胃癌组织中的蛋白表达量明显低于相应的癌旁正常组织（P<0.0001）,HIF-1α在人体胃癌组织中的蛋白表达量显著高于相应的癌旁正常组织（P<0.0001）;（2）SPOP蛋白表达量高的胃癌患者总生存率较SPOP蛋白表达量低的患者高,HIF-1α蛋白表达量高的胃癌患者总生存率低于HIF-1α蛋白表达量低的患者（P<0.05）。2.SPOP、HIF-1α对胃癌细胞生物学行为的影响（1）SPOP蛋白在胃癌细胞系MKN45中的表达中等;（2）降低SPOP表达可促进人胃癌细胞系MKN45的增殖及迁移;（3）HIF-1α抑制剂PX-478可抑制胃癌细胞的增殖及迁移能力,降低HIF-1α表达可拮抗SPOP对胃癌细胞的增殖及迁移作用。3.SPOP靶向HIF-1α调控胃癌细胞生物学行为的机制研究（1）免疫共沉淀提示胃癌细胞中内源性蛋白SPOP与HIF-1α存在相互作用,且HIF-1α主要结合在SPOP氨基酸N端1-189位置（MATH结构域）;（2）Western blot结果证明SPOP敲减组中的SPOP、E-cadherin表达水平低于对照组,HIF-1α、Vimentin的表达水平高于对照组。结论:1.SPOP与HIF-1α蛋白在胃癌组织中的表达呈相反趋势,且SPOP蛋白表达低的患者总生存期低,而HIF-1α蛋白表达低的患者总生存期高。2.降低SPOP表达可以促进胃癌细胞发生增殖及迁移,同时降低HIF-1α表达可以拮抗降低SPOP表达所致的细胞增殖及迁移;3.SPOP与HIF-1α在胃癌细胞中存在相互作用;4.SPOP可能通过靶向HIF-1α蛋白,进而调控EMT相关信号通路影响胃癌细胞的生物学行为。