基于IL-6/JAK/STAT3信号通路研究没食子提取物抗溃疡性结肠炎的作用机制

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目的:应用2,4,6三硝基苯磺酸--乙醇复合法建立溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型,研究没食子提取物对UC大鼠模型的治疗作用,并从抗炎、抗氧化、细胞因子、结肠组织UC相关基因和蛋白表达等方面研究其抗UC作用机制。方法:(1)应用2,4,6三硝基苯磺酸-乙醇复合法建立UC大鼠模型;(2)采用一般观察、体重变化等情况初步评估正常组、模型组、各给药组对UC大鼠治疗作用。(3)采用ELISA法,测定没食子提取物对UC大鼠血清IL-6、IL-10、TNF-α、PGE2等细胞因子的表达水平。(4)采用羟胺法、TBA法,测定没食子提取物对UC大鼠血清SOD、MDA活性。(5)采用ELISA法,测定没食子提取物对UC大鼠血清JAK蛋白的表达。(6)采用RT-PCR法,检测没食子提取物对UC大鼠溃疡组织stat3、IL-6、TNF-α逆转录水平的影响。结果:(1)与正常组比较,模型组外周血白细胞数量升高(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组、没食子提取物低、高剂量组外周血白细胞数量降低(P<0.05),没食子复方组低剂量组外周血白细胞降低(P<0.05);(2)与正常对照组比较,模型组TNF-α、PGE2、IL-6水平升高,IL-10水平降低(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组、没食子提取物低、高剂量组TNF-α、PGE2、IL-6水平降低,IL-10水平升高(P<0.05),没食子复方组低、高剂量组TNF-α、PGE2、IL-6水平降低,IL-10水平升高(P<0.05)。(3)与正常组比较,模型组SOD水平降低,MDA水平升高(P<0.01)。与模型组比较,阳性对照组、没食子提取物低、高剂量组SOD水平升高,MDA水平降低(P<0.05),没食子复方组高剂量SOD水平升高,没食子复方组低剂量MDA水平降低(P<0.05)。(4)与正常组比较,模型组JAK蛋白的表达量是升高(P<0.01)。与模型组比较,阳性对照组、没食子提取物高剂量组JAK蛋白的表达下降,没食子复方组低剂量JAK蛋白的表达下降(P<0.05)。(5)与空白组比较,模型组IL-6、TNF-α、STAT3的表达是升高(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组、没食子提取物高剂量组IL-6表达是降低,没食子提取物低、高剂量组TNF-α、STAT3表达是降低,没食子复方组高剂量组IL-6、TNF-α表达是降低(P<0.05)。结论:没食子提取物可促进UC大鼠模型溃疡的愈合,明显改善UC大鼠结肠病变组织病理学结构,可使UC大鼠血液WBC、IL-6、PGE2、TNF-α、MDA水平降低,SOD、IL-10水平升高,具有明显抗炎和抗氧化损伤作用;其作用机制可能通过降低血清IL-6、TNF-α水平和病变组织IL-6、TNF-α基因表达,进而降低JAK蛋白的表达,降低stat3磷酸化,引起stat3基因表达降低,通过多靶点作用起到抗溃疡性结肠炎作用。
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