维甲酸联合干扰素上调GRIM-19基因的表达及抑制多发性骨髓瘤细胞株增殖的机理研究

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IFN与RA是临床常用的恶性血液病治疗药物,传统认为两者主要通过诱导细胞凋亡与分化发挥作用。最新研究发现,IFN与RA联合应用可诱导多种肿瘤细胞GRIM-19(the genes-associated with retinoid-interferon induced mortality,维甲酸-干扰素诱导死亡相关基因)的表达,抑制肿瘤细胞生长。GRIM-19也因此被认为是一种死亡调节因子。研究发现GRIM-19主要通过与Stat3的转录活性区域(tansactivation domain,TAD)结合而发挥对Stat3的抑制作用,进而达到抑制肿瘤细胞增殖的作用。多发性骨髓瘤(MM)是一种浆细胞异常增生的恶性肿瘤,它占全部血液系统肿瘤的10%左右,多发于中老年,实验研究结果表明多发性骨髓瘤细胞内存在STAT3的高表达,但是,是否可以通过IFN与RA联合应用诱导GRIM-19的表达,近而抑制骨髓瘤肿瘤细胞增值的研究尚未见报道。目前MM主要治疗手段为化疗及自体干细胞移植等。常规化疗的有效率为40%~60%,完全缓解率低于5%,中位存活期不超过3年。同时,临床工作中有许多患者因各种原因不能进行移植,因而我们需要更为有效的药物治疗MM。本研究以多发性骨髓瘤8226细胞株为研究对象,观察ATRA和IFN-α联合应用对8226细胞株增殖的影响,探讨ATRA和IFN-α联合应用对凋亡相关基因GRIM-19及STAT3的作用机理,筛选ATRA和IFN-α联合应用的最佳时间和剂量;从而为寻找更为有效的多发性骨髓瘤治疗药物提供实验依据。实验结果表明ATRA1μmol/L联合IFN-α1000U/mL作用72h对8226细胞有显著的增殖抑制作用,与溶媒对照组、ATRA或IFN-α单独应用组比较,差异显著(P <0.05)。RT-PCR结果表明,ATRA和IFN-α两药合用可使8226细胞GRIM-19mRNA表达增强,与对照组以及ATRA、IFN-α单独用药组比较,差异显著(P<0.05)。Western blot结果显示,两药合用组GRIM-19蛋白表达增强,STAT3蛋白表达减弱,与对照组、ATRA、IFN-α单独用药组比较,差异有显著性(P<0.05)。上述实验结果表明ATRA和IFN-α联合应用可抑制8226细胞的增殖,其机制之一可能是通过上调GRIM-19基因表达,进而抑制原癌基因STAT3表达实现的。
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