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糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney diseases,DKD）是糖尿病（diabetes mellitus,DM）主要而严重的微血管并发症之一。DKD已成为世界公共卫生的重大难题。而中药复方属于组合药物,具有多成分、多靶点、多途径和综合疗效的特点,是成为有效治疗DKD的潜在新措施。前期临床试验表明,中药复方“糖肾方”能够有效治疗DKD;多个基础研究也证实糖肾方具有抗炎、抗纤维化、降低血脂、保护足细胞、降低尿蛋白等作用,并通过AMPK-PPARα、NF-κB、TGF-β/Smad3、AMPK/SIRT1、TRPC6/Talin1等信号通路发挥作用。但是糖肾方的物质基础及药效成分并不明确,相关作用机制还有待进一步阐释。目的:考察两种水提工艺的糖肾方治疗DKD的药效比较研究,并进一步揭示其药效成分,相关作用机制及其体内作用过程。方法:1八周龄雄性KKAy小鼠随机分为3组,分别为模型组（KKAy）（n=7）、KKAyTSF1组（合并二次水提工艺,n=7）、KKAyTSF2组（合并三次水提工艺,n=7）,八周龄雄性C57BL/6J小鼠（《=7）为正常对照组,正常对照组小鼠给予常规普通饲料喂养,全部KKAy小鼠给予专属KK高脂饲料喂养,并将两种水提工艺的糖肾方开始分别干预16周,分别考察体重、空腹血糖（FBG）、尿白蛋白和尿肌酐比值（UACR）水平;采用全自动生化仪检测血清尿素（BU）和血肌酐（SCr）;利用PAS和HE染色观察肾脏病理。2利用UHPLC-Q-Orbitrap HRMS技术筛查糖肾方化学成分组成,并采用UHPLC-MS/MS技术测定两种水提工艺糖肾方中25种活性成分含量。3采用UHPLC-MS/MS技术靶向筛查糖肾方的入血成分;基于入血成分,采用网络药理学构建药物-靶点-通路网络,获得糖肾方治疗DKD的药效成分及相关作用通路,并基于 Betweenness Centrality、Closeness Centrality 以及 Degree 三个拓扑参数筛查重要药效成分及重要作用通路。4 利用 UHPLC-Q-Orbitrap HRMS 技术检测 KKAy 模型组、KKAyTSF1 组及C57BL/6J小鼠的血清成分,通过代谢组学技术筛查出DKD的潜在生物标志物,并结合网络信息及文献,挖掘糖肾方治疗DKD的相关作用机制。5将雄性SD大鼠随机分成实验组（n=6）和空白组（n=3）,给予4 g/kg合并二次水提工艺的糖肾方进行灌胃,分别在灌胃后10 min、20 min、30 min、40 min、50min、1 h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、24h 进行尾静脉取血,采用 UHPLC-MS/MS技术测定血浆中糖肾方20种药效成分的含量,并统计糖肾方中8种药效成分的药代动力学相关参数。结果:1糖肾方能够改善KKAy小鼠肾损伤;而相比于合并三次水提工艺,合并二次水提工艺的糖肾方更显著降低KKAy小鼠UACR水平,更显著改善肾小管间质病理情况。2糖肾方成功筛查并鉴定出85种化学成分;而合并二次水提工艺的糖肾方中獐牙菜苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊花苷、新圣草次苷、金丝桃苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、人参皂苷Rg1、大豆苷元、枸橼苷、毛蕊异黄酮、大黄酸、柚皮素、染料木素、黄芪甲苷、刺芒柄花素、芦荟大黄素和大黄素的含量高于合并三次水提工艺。3基于入血成分及网络药理学研究,糖肾方治疗DKD的药效成分有20种,其中包括7种重要药效成分如柚皮苷、大豆苷元、染料木素、刺芒柄花素、芦荟大黄素、橙皮素和人参皂苷Rg1。而糖肾方治疗DKD的相关作用机制有30条,其中包括7条重要信号通路,如HIF-1信号通路、TNF信号通路、AMPK信号通路、PI3K-Akt信号通路、Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路以及胰岛素信号通路。4基于代谢组学的研究,糖肾方有可能作用于不饱和脂肪酸的代谢通路、氨基酸代谢通路以及色氨酸代谢通路。5糖肾方的药效成分AUC0-t在38-684 ng/mL*h间和T1/2在1-9 h间。结论:合并二次水提工艺比合并三次水提工艺的糖肾方改善KKAy小鼠的肾损伤更显著,很可能与獐牙菜苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊花苷、新圣草次苷、金丝桃苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、人参皂苷Rg1、大豆苷元、枸橼苷、毛蕊异黄酮、大黄酸、柚皮素、染料木素、黄芪甲苷、刺芒柄花素、芦荟大黄素和大黄素的含量较高有关;糖肾方治疗DKD的20种药效成分中柚皮苷、大豆苷元、染料木素、刺芒柄花素、芦荟大黄素、橙皮素和人参皂苷Rg1重要药效成分,糖肾方治疗DKD的30条作用通路中HIF-1信号通路、TNF信号通路、AMPK信号通路、PI3K-Akt信号通路、Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路以及胰岛素信号通路是重要作用通路;另外,糖肾方有可能作用于不饱和脂肪酸的代谢通路、氨基酸代谢通路以及色氨酸代谢通路;而糖肾方的药效成分AUC0-t在38-684 ng/mL*h间和T1/2在1-9 h间,为临床合理给药方案提供参考。