随着生活水平的提高,生活方式的改变,高血脂症成为动脉粥样硬化的首要危险因素,与高血糖、高血压、非酒精性脂肪肝病、胆石症等疾病的形成密切相关,成为危害人类生命健康的“三大杀手”之一。开发具有高效降血脂功能益生菌产品,对缓解人类高血脂具有重要意义。传统发酵牦牛酸乳作为藏民传统发酵乳制品,不仅具有丰富的营养价值,还蕴藏着丰富的益生菌资源。从牦牛酸奶中分离筛选出具有潜在益生功能菌株,利用高血脂小鼠动物模型,通过血液指标测定以及对脂代谢相关基因进行检测,评价了Lactobacillus casei YBJ02对高血脂小鼠脂代谢调节作用与机理。(1)对18株实验室保存的未鉴定的乳杆菌进行分子生物学鉴定,鉴定干酪乳杆菌(Lactobacillus casei strain)4株,发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum strain)9株,植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum strain)5株。通过抗酸、抗胆盐、疏水性、降胆固醇实验,筛选出1号菌株(Lactobacillus casei strain)为优良菌株。Ph=3.0的人工胃液存活率为93.92%,0.3%胆盐耐受力为16.93%,疏水能力为41.43%,胆固醇去除率为58.22%。相对于其他菌株,1号菌株具有较强的胆盐水解酶活性。通过形态学分析以及生化发酵实验进一步验证了该菌株为干酪乳杆菌,被命名为Lactobacillus casei YBJ02。(2)通过高脂小鼠动物模型试验发现Lactobacillus casei YBJ02菌株对小鼠无毒害作用,不同浓度的菌液对小鼠血脂水平提高具有一定的抑制作用。尤其是高浓度菌液能降低小鼠体内胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白的含量,但对高密度脂蛋白无显著性影响。通过对小鼠肝脏中胆固醇含量测定,小鼠粪便中胆固醇和水分含量的测定,可知,高脂饲料能够增加肝脏的脂肪堆积,未被小鼠吸收的多余胆固醇随粪便排出,而且高浓度菌液能够有效增加胆固醇随粪便的排出量。高脂饲料会引起小鼠粪便干燥,喂食乳酸菌能够增加小鼠粪便含水量。(3)通过小鼠体内实验结果,对影响小鼠脂代谢相关基因进行测定。通过荧光定量实验可知,在肾部脂肪中,高脂饲料能够增加PPARγ、CEBP/α、SREBP-1c、FAS的表达量,不同浓度的菌液能够降低其表达量,尤其是高浓度菌液能够有效抑制PPARγ、CEBP/α、SREBP-1c的表达,但对FAS的表达无显著性的抑制作用。在肝脏中,PPARγ、FAS的表达量低,且无显著性差异。采用western blot进一步查看CEBP/α、SREBP-1c在小鼠肝脏中的表达量,发现CEBP/α表达量极低,无法检出。虽然SREBP-1c的蛋白表达量也不是很高,但每组存在显著性差异,高脂饲料引起了肝脏中SREBP-1c表达含量的升高,喂食菌液组能够抑制其表达,且高浓度菌液组有更好的抑制作用。