癌症作为二十一世纪危害人类健康安全的重要原因之一,其发病率与死亡率正在逐年上升。化学治疗是目前最有效的临床治疗手段之一,但其常常伴随很强的副作用,严重限制了药物疗效的发挥,也影响病人的生存质量。阿霉素(Dox)便是目前最常用的癌症化疗药物之一,它通过抑制癌细胞的基因复制从而达到抗癌效果,具有广谱抗癌作用,但是其却拥有着较高的心脏毒性。如何在化疗过程中提高Dox的疗效同时降低其毒副作用是人们关心的问题。阳离子抗癌肽由于其独特的细胞膜作用机理以及高效广谱的抗癌疗效,受到人们的日益关注。HPRP-A1是一种阳离子抗癌肽,它不仅可以通过改变细胞膜的通透性进入细胞,还可以进一步诱导细胞凋亡而达到抗癌效果。本课题以阿霉素Dox和抗癌肽HPRP-A1为对象,设计构建一种酸敏感的药物递送系统,即通过酸敏感的腙键将Dox与HPRP-A1偶联,形成一种新的化合物Dox-HPRP-A1,并对其抗癌活性及作用机制进行研究。首先设计并优化了Dox-HPRP-A1的合成、纯化、定量实验体系,并通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)、飞行时间质谱仪对Dox-HPRP-A1进行纯化与鉴定。通过RP-HPLC对Dox-HPRP-A1的pH敏感特性进行体外研究,结果证明在酸性条件下,Dox-HPRP-A1的水解速度要明显高于在中性条件下。进一步,我们选取人源肝癌细胞HepG2细胞系对化合物的抗癌活性进行了初步的研究。CCK-8细胞毒性实验证实,与单独Dox和HPRP-A1相比,新化合物Dox-HPRP-A1表现出更强的抗癌活性。通过胞吞实验与LDH释放实验证明DoxHPRP-A1进一步证实,Dox-HPRP-A1进入细胞的方式主要为改变细胞膜的通透性而不是胞吞。接下来,我们对HepG2细胞摄取Dox-HPRP-A1的机制进行了探究。通过激光共聚焦显微镜(CLSM)可以更加直观地观察到,与Dox相比,Dox-HPRP-A1能够更为迅速高效地进入细胞中;流式细胞术检测HepG2对于Dox-HPRP-A1的摄取效率也得到了同样的结论。通过荧光共定位实验证明Dox-HPRP-A1进入细胞后会进入到溶酶体中。最后,我们对DoxHPRP-A的抗癌机理进行了研究,通过流式细胞术结果可以看出Dox-HPRP-A1具有更强的诱导细胞凋亡的能力方面,并使HepG2细胞的细胞周期被主要阻滞在G2期。综上,本实验所设计合成的Dox-HPRP-A1拥有更强的抗癌活性与更高效的细胞摄取效率,能够在短时间内进入细胞中发挥相应的作用。类似联合用药的协同作用机制,抗癌肽与阿霉素的偶联可以使其具备优势互补的作用机制,在增强抗癌疗效的基础上,降低毒副作用,为抗癌药物的研发提供了新的思路。