连翘酯苷对拟AD动物模型学习记忆的改善作用及其机制的研究

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连翘在我国已有近千年的用药历史,是中国临床常用传统中药之一。连翘酯苷(3,4-二羟基苯乙基-O-a-鼠李糖基(1—6)-4-0-咖啡酰基-p-葡萄糖苷)是连翘干燥果实中提取出来的有效成分,已有很多报道其具有抗炎抗氧化及抗菌等作用。然而,目前对连翘酯苷的研究多集中在体外实验,影响了连翘酯苷的临床应用。基于连翘酯苷的抗炎抗氧化作用,本论文选用不同的拟AD整体动物模型,研究了连翘酯苷改善学习记忆的作用,并对其作用机制进行了初步的研究,为今后的临床应用提供参考。主要研究内容如下:首先,采用自主活动、水迷宫和避暗三种计算机图像实时监测分析处理系统,选择了Aβ25-35诱导KM小鼠模型、Aβ25-35诱导BALB/C小鼠模型及SAMP8三种不同学习记忆损伤模型,对连翘酯苷的行为学作用进行了评价。实验结果表明,连续45天口服给予连翘酯苷240、120、60mg·kg-1·d-1,可显著缩短Morris水迷宫定位航行实验中的逃避潜伏期,增加游出率,并明显延长探索试验中小鼠在原实台象限时间及增加穿台次数;显著减少SAMP8小鼠在被动回避反应中的错误次数及错误区时间,并延长其入暗潜伏期,表明连翘酯苷不仅可以改善小鼠空间学习记忆,而且可以改善非空间学习记忆。其次,在行为学实验的基础上,本文从抗氧化、抗炎、胆碱能系统、神经递质等方面探讨了连翘酯苷改善学习记忆的作用机制。研究结果显示连翘酯苷可显著增强小鼠脑组织抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性,同时降低氧化产物MDA、NO的含量;连翘酯苷显著降低脑内炎性介质IL-1β、IL-6的含量及β-淀粉样蛋白的表达;连翘酯苷可显著降低乙酰胆碱酯酶的活性,并增加乙酰胆碱转移酶的活性及乙酰胆碱的含量;连翘酯苷显著增加兴奋性氨基酸GLU的含量并降低抑制性氨基酸GABA的含量。最后,本研究采用HE染色和尼氏染色两种方法观察了连翘酯苷对AD动物模型小鼠脑组织海马病理形态的影响,结果显示连翘酯苷可显著减轻小鼠海马CA1区的病变,表现为长期给予连翘酯苷后海马CA1区结构清晰,几乎没有散在的炎性细胞,神经元细胞排列相对整齐规则,尼氏体致密,数量显著增加,可见连翘酯苷可以改善神经元的功能状态和细胞形态,从而维持了中枢神经系统的正正常功能,对阿尔茨海默病可能有较好的治疗作用。
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