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目的探讨TRPC对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞增殖、迁移及管腔形成的作用及VEGF表达的影响材料与方法1.将HREC分为三组,分别加入含5.5、30mM葡萄糖以及30mM甘露醇的培养基,干预24、48小时后提取细胞RNA,检测高糖对TRPC不同亚型（TRPC1、TRPC3、TRPC6）的mRNA表达影响2.将HREC分为六组（5.5mM、30mM、30mM+2mg/LSKF96365、30mM+4mg/L SKF96365、30uM+8mg/L SKF96365、30uM+16mg/L SKF96365）,将细胞加入96孔板内,每孔约4000个细胞,待细胞贴壁,饥饿处理24小时后,加入不同浓度糖及TRPC干预剂SKF96365药物干预24 h后,每孔加入CCK-8试剂10μl,37℃培养箱放置2到4 h,酶联仪检测每孔内450nm波长的吸光度（OD值）,记录并分析。3.将HREC分为上述六组,将细胞均匀加入到6孔板内,待细胞铺满板底后,无菌黄枪尖垂直板底进行划痕,去除漂浮的细胞后,加入含不同浓度D-葡萄糖和SKF96365的无血清培养基,于含5%CO2的37℃培养箱中培养,并于0 h、12 h、24 h拍照,Photoshop CS2软件计算迁移距离。4.按上述六组处理细胞24小时,每孔约200μl细胞悬液接种于Transwell小室的上室,下室分别按照分组加入800μl含有不同成分的10%FBS的DMEM培养基,每组设3个复孔,于恒温培养箱中放置16小时固定、染色:取出小室,以棉签头小心刮除掉上室面的细胞,以4%多聚甲醛固定下室面的细胞30 min,然后在0.1%结晶紫下染色20min,PBS冲洗,室温干燥5分钟后置于显微镜下分别观察并统计各组迁移的细胞数目变化。5.按照上述细胞分组将1.5×104细胞以及糖和不同浓度药物SKF96365加入到含Matrigel基质胶的96孔板内,培养箱内培养8小时后拍照,管腔数目统计并分析。6.按上述方法将细胞分成六组,加入不同浓度糖和药物SKF96365处理细胞24小时后,抽提RNA,运用RT-PCR技术检测VEGF在mRNA的表达。结果1.PCR结果显示,高糖诱导人视网膜血管内皮细胞24、48小时后TRPC1、TRPC6在基因水平表达增高,呈时间依赖性（P<0.05）;8、16mg/LSKF96365干预组人视网膜血管内皮细胞的VEGFmRNA表达下降,（P<0.05）。2.CCK-8结果显示,4、8、16mg/L SKF96365干预组抑制细胞增殖（P<0.05）。3.细胞划痕法检测结果显示,干预12、24 h时,4、8、16mg/L SKF96365干预组HREC迁移距离均明显减少（P<0.05）。4.Transwell结果显示,8mg/L、16mg/L SKF96365干预组,迁移细胞的数量较正常组明显较少（P<0.05）。5.体外成管实验显示,8、16mg/LSKF96365干预组管腔形成减少（P<0.05）。结论1.高糖可诱导人视网膜血管内皮细胞的TRPC1、TRPC6的mRNA表达增高;2.阻断TRPC通路可抑制高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞的增殖、迁移、管腔形成,并且下调VEGF的mRNA表达量。