多趾是猪常见的一种遗传缺陷，其分子遗传学基础尚不清楚。对控制多趾的相关基因及其分子机制进行研究，有利于我们深入了解多指（趾）畸形的形成机制，揭示肢体发育的过程和机理。因此，本试验对控制猪多趾相关的基因进行初步定位和克隆，并探讨了造成猪多趾突变的原因，为阐明猪多趾产生的分子机制奠定了基础。1猪多趾基因的初步定位选取一个三代多趾猪家系（共38头，其中多趾10头，正常28头）作为研究对象，以人、鼠等动物已经定位的多趾基因的染色体区段为参考，通过比较基因组学，寻找猪的同源染色体区段并选择微卫星标记，应用聚合酶链式反应，变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术进行基因分型，采用LINKAGE 5.2软件包进行参数连锁分析。比较基因组学分析结果表明，猪的多趾相关基因位于9号染色体长臂（9q）和18号染色体上。在9q上选取6个（SW539、S0019、SW2093、SW174、SW2116、SWR1014）微卫星标记，在18号染色体上选取3个（SW1023、SW787、S0177）微卫星标记，对家系中的每一个个体进行基因分型。分型结果显示，微卫星标记SWR1014和SW1023在此家系中无多态性，均呈现纯合子基因型，而其它标记都显示出了良好的多态性。在常染色体显性遗传（AD）模式下，假设外显率为100％，重组率为0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5（公母猪重组率相等），疾病基因频率为10^-4时，9号染色体上的位点SW2116在重组率为0.2时获得最大两点Lod值2.10，而其它位点的两点Lod值均小于1，这说明微卫星标记SW2116与猪的多趾基因可能存在连锁关系，而其它标记与疾病基因均不连锁。2猪Lmbr1基因的克隆在实际生产中，我们发现猪的多趾绝大多数为轴前多趾（PPD），但控制猪多趾基因的研究尚属空白。Lmbr1基因是人、小鼠、鸡PPD表型的候选基因，因此我们以一个多趾猪和它的一个全同胞正常个体为研究对象，根据人、小鼠和鸡的Lmbr1基因序列为基础，在Genebank中寻找猪的同源EST，据此设计引物，采用RACE、RT-PCR技术对猪的Lmbr1基因cDNA序列进行克隆、测序并进行突变分析。结果如下：（1）对于正常个体，共克隆出Lmbr1基因cDNA序列1795bp，包括3’端完整序列和5’端部分序列；多趾个体克隆出3’端序列1069bp。（2）将克隆出的正常个体的Lmbr1序列与人或鼠的C7orf2／Lmbr1相比较，CDS的5’端序列还有约330bp未克隆出，它与Genebank中发布的人C7orf2序列（登录号：NM₀22458，共2781bp，其中155bp-1627bp部分为CDS）的471bp-1627bp区段相比，同源性将近91％。（3）多趾个体和正常个体Lmbr1基因的CDS 3’端序列相比较，结果显示，多趾个体缺少16、17外显子共计231bp，但这是否为造成猪多趾突变的原因，还有待于进一步证实。