TRIM29对鼻咽癌细胞生长和迁移的影响

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目的:研究TRIM 29、SQSTM 1、RDX基因在不同转移潜能鼻咽癌细胞系中的表达水平,了解其与鼻咽癌细胞侵袭转移的关系,揭示TRIM 29在鼻咽癌细胞侵袭转移中的作用。方法:(1)采用qRT-PCR(Quantitative Reverse transcriptase Polymerase chain reaction)和蛋白印迹法(Western Blotting)分别检测高转移潜能鼻咽癌细胞系5-8F和低转移潜能鼻咽癌细胞系6-10B中TRIM 29、SQSTM 1、RDX基因的mRNA和蛋白表达水平;(2)脂质体转染法将TRIM 29特异性SiRN域体和空白载体转染5-8F细胞,建立稳定转染细胞系;(3)采用Western Blotting检测细胞中TRIM 29蛋白表达水平的变化;MTT法检测细胞增殖能力的变化;流式细胞仪检测细胞周期分布的变化;划痕实验观察细胞迁移能力的变化。结果:(1)5-8F细胞中TRIM 29、SQSTM 1的表达水平明显高于6-10B细胞,而RDX的表达水平低于6-10B细胞;(2)建立了TRIM 29低表达的5-8F细胞系及其空白载体稳定转染细胞系;(3)与空白载体转染的5-8F细胞和未转染5-8F细胞比较,特异性SiRNA转染的TRIM 29低表达5-8F细胞的增殖能力降低,G0/G1细胞增加,而S期细胞减少,细胞迁移能力降低。结论:(1)SiRNA干扰TRIM 29表达抑制鼻咽癌5-8F细胞的生长和迁移;(2)TRIM 29、SQSTM 1与鼻咽癌转移密切相关,有望成为预警鼻咽癌转移的分子标志物,但RDX与鼻咽癌转移关系不确定。
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