【摘 要】
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目的:提出一种适于微生物多样性分析的青贮饲料中微生物总DNA的提取方法,并评价其效果。方法:间接法抽提样本的总DNA,通过琼脂糖电泳、紫外吸收及PCR分析DNA质量,DGGE评价提
【机 构】
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山东大学微生物技术国家重点实验室,康地恩生物集团
【基金项目】
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国家“863”计划项目资助(2006AA10Z3442006AA10Z321)
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目的:提出一种适于微生物多样性分析的青贮饲料中微生物总DNA的提取方法,并评价其效果。方法:间接法抽提样本的总DNA,通过琼脂糖电泳、紫外吸收及PCR分析DNA质量,DGGE评价提取效果,用PCR扩增目的菌株的特定片段来检测提取方法的灵敏度。结果:两个样本DNA的A260/A280值分别为1.99和1.93,A260/A230值分别为2.19和1.90,提取的DNA不需纯化便可直接用于16S rRNA基因的扩增,提取方法灵敏度为3cfu/g,DGGE结果表明提取方法可以涵盖样品中的所有微生物。结论:提取的DNA纯度较高,可直接用于下游分子操作,提取方法灵敏度较高,能全面反映样品中的微生物原貌,可用于免培养法研究青贮饲料中的微生物菌群组成。
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